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基于G—三链体分子信标的多聚核苷酸激酶荧光检测新方法

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G—三链体(G3)由三段连续G碱基的富G序列组成的,因其潜在的生物学功能和特殊的结构受到越来越多的关注.G3序列能结合硫磺素T(ThT)发出强荧光,以此作信号报告分子,本文提出了一种基于G3分子信标(MB)的T4多聚核苷酸激酶(PNK)荧光检测新方法.有T4 PNK时,P1的5'末端被磷酸化,P1/G3MB双链结构中的P1被外切酶酶切,封闭在G3MB中的G3序列不能结合ThT,得到弱荧光信号.无T4 PNK时,P1/G3MB双链结构能阻止外切酶酶切,G3MB被打开,释放G3序列结合ThT荧光增强.该方法对T4 PNK检测的线性范围为0.0002～0.01 U/μL,检测限为0.0002 U/μL.该方法具有操作简便、成本低和选择性高等优点,并可用于T4 PNK酶活性抑制剂的评估.
A novel method for fluorescence detection of polynucleotide kinases based on G—triplex based molecular beacon

朱文平、刘硕硕、李志怡

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周口师范学院化学化工学院,河南周口 466001

T4多聚核苷酸激酶 硫磺素T G—三链体 分子信标

周口师范学院校本项目

ZKNUB1201701

2022

10.13450/j.cnki.jzknu.2022.05.010

周口师范学院学报
周口师范学院

周口师范学院学报

影响因子：0.162
ISSN：1671-9476
年,卷(期)：2022.39(5)
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