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玉米SSIIb蛋白多克隆抗体的制备及其应用

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抗体是蛋白质功能研究的重要试剂.玉米蛋白的功能研究因缺乏相应的抗体而难以开展.玉米淀粉合酶IIb与淀粉合酶Ⅱa均属于淀粉合酶,其主要负责支链淀粉的延伸.但对淀粉合酶Ⅱb的报道较少,本研究以原核表达的淀粉合酶IIb的C端(455～704 aa)GST融合蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,分离血清制备SSIIb多克隆抗体.Western blot试验发现,SSIIb多克隆抗体不但能识别SSIIb-C(455～704 aa)抗原,而且能识别玉米不同发育阶段胚乳中SSIIb蛋白.利用该多克隆抗体的Western blot试验表明,玉米SSIIb蛋白的表达在授粉后10 d到30 d的胚乳中表达模式是先增后降,授粉后15 d表达量最高,而半定量RT-PCR的结果表明授粉后20 d SSIIb的转录水平最高.这些结果表明成功制备了特异的玉米SSIIb的多克隆抗体,并能在Western blot中特异识别玉米内源SSIIb蛋白,为进一步深入研究SSIIb蛋白功能奠定基础.
Preparation and application of polyclonal antibody against SSIIb protein from maize

余国武、青芸、何珊、黄玉碧

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四川农业大学农学院作物科学国家级实验教学示范中心, 四川成都 611130

SSIIb 多克隆抗体 原核表达 Western blot

国家转基因生物新品种培育重大专项国家自然科学基金四川省博士后科研特别资助项目留学回国人员科技活动择优资助项目

2016ZX08003-001315013220313010400124300

2022

10.3724/SP.J.1006.2022.03010

作物学报
中国作物学会　中国农业科学院作物科学研究所

作物学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.803
ISSN：0496-3490
年,卷(期)：2022.48(1)
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