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致病疫霉诱导的马铃薯酵母双杂交文库构建及无毒蛋白PiAVR3b寄主靶标筛选

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致病疫霉是引起番茄、马铃薯晚疫病的植物病原卵菌,其分泌的效应蛋白在抑制寄主免疫方面发挥重要功能.鉴定效应蛋白的寄主靶标对研究植物与病原菌互作具有重要意义.本研究构建了高效马铃薯酵母双杂交cD-NA文库,并通过筛选致病疫霉无毒蛋白PiAVR3b的互作蛋白来评价构建文库质量.分别提取接种致病疫霉后24 h和48 h的马铃薯栽培种'合作88'叶片RNA,等量混合后构建cDNA文库.次级文库容量为1.6×107 cfu/mL,重组率为100％,插入片段平均在1 000 bp以上.以PiAVR3b为诱饵,通过酵母双杂交筛选初步获得10个候选靶标蛋白.经点对点验证,进一步确定了 4个与PiAVR3b互作的靶标蛋白,分别是马铃薯MYB-like蛋白、线粒体外膜孔蛋白、碳分解代谢抑制蛋白、肽基脯氨酰异构酶.本研究构建的酵母双杂交文库为致病疫霉效应蛋白靶标筛选及植物与病原菌互作研究奠定了基础.
Construction of yeast two-hybrid cDNA library induced by Phytophthora infestans and screening host targets for avirulence protein PiAVR3b in potato

韦吉、栾宏瑛、王荟洁、刘晶、王洪洋、陈爱娥

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云南省马铃薯生物学重点实验室,云南省高校马铃薯生物学重点实验室,云南师范大学,昆明 650500

云南师范大学教务处,昆明 650500

马铃薯 致病疫霉 酵母双杂交 PiAVR3b蛋白 靶标蛋白

国家自然科学基金国家自然科学基金云南省基础研究计划

31800134320604992019FB023

2022

10.16688/j.zwbh.2021340

植物保护
中国植物保护学会 中国农业科学院植物保护研究所

植物保护

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.004
ISSN：0529-1542
年,卷(期)：2022.48(4)
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