植物检疫2022,Vol.36Issue(1) :39-44.DOI:10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2022.01.002

逆转录交叉引物等温扩增检测南方菜豆花叶病毒方法的建立

Development of a method of reverse transcription-cross-priming amplification for the detection of southern bean mosaic virus

王道 张蓬军 胡学难 魏霜 孙凯 杨倩倩 俞晓平
植物检疫2022,Vol.36Issue(1) :39-44.DOI:10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2022.01.002

逆转录交叉引物等温扩增检测南方菜豆花叶病毒方法的建立

Development of a method of reverse transcription-cross-priming amplification for the detection of southern bean mosaic virus

王道 1张蓬军 1胡学难 2魏霜 2孙凯 1杨倩倩 1俞晓平1
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作者信息

  • 1. 计量大学生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室 浙江杭州310018
  • 2. 广州海关技术中心
  • 折叠

摘要

南方菜豆花叶病毒(southem bean mosaic virus,SBMV)是我国进境植物检疫性病毒,可随豆类种子远距离传播.本研究针对SBMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列设计特异引物组,建立了一种反转录(reverse transcription,RT)交叉引物扩增(cross-priming amplification,CPA)快速检测方法,并分别结合实时荧光和侧向层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)检测扩增产物构建了实时荧光RT-CPA和RT-CPA-LFD体系.结果 显示,所建立的针对SBMV的RT-CPA检测方法特异性强,以其他4种可随豆类种传的植物检疫性病毒为对照,均无交叉反应.其中,实时荧光RT-CPA和RT-CPA-LFD检测SBMV灵敏度分别达5× 10-4 ng/μL和5 ng/μL.所建立的RT-CPA检测SBMV方法具有快速、准确、可视化等优点,在口岸检测中具有良好的应用前景.

关键词

南方菜豆花叶病毒/等温扩增技术/交叉引物扩增/检测

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基金项目

国家重点研发计划(2018YFC0809200)

国家重点研发计划(2017YFF0210200)

出版年

2022
植物检疫
中国检验检疫科学研究院

植物检疫

CSTPCD
影响因子:0.498
ISSN:1005-2755
被引量1
参考文献量10
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