摘要
大豆南方茎溃疡病是一种世界上危害严重的大豆病害,其病原菌(Diaporthe aspalathi)被列入我国进境植物检疫性有害生物名录.本文基于ITS序列差异设计引物和探针,建立了 D.aspalathi常规PCR和荧光PCR检测方法.测试结果表明,常规PCR引物DM-F/DM-R3扩增33个供试菌株,6个D.aspalathi菌株出现394bp的预期扩增条带,其余供试菌株均无目的条带,检测灵敏度为5pg菌丝体DNA.探针DM-Pro仅对6个D.aspalathi菌株表现为阳性,其余供试菌株均为阴性,检测灵敏度为500fg菌丝体DNA.同时,采用这两种方法对进境大豆种子及植株残体等样品进行了验证.以上结果表明,这两种检测方法具有快速、准确、灵敏等优点,可应用于口岸对大豆南方茎溃疡病菌的检疫鉴定及疫情监测.