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二维液相色谱法在羊草地上部总蛋白分离中的应用

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取8周龄羊草的地上部分,用三氯乙酸-丙酮法沉淀总蛋白,沉淀裂解后将缓冲液置换为起始缓冲液,进行第一维色谱聚焦分离.将第一维分离收集的pH值为8.5至4.0之间的组分分别进行第二维无孔硅胶反相高效液相色谱分离,利用ProteoVue软件获得羊草植株总蛋白pI/UV图谱,即羊草植株总蛋白质表达谱.文中对二维液相色谱法分离羊草蛋白质进行了方法学的研究,在第二维分离中尝试用3种不同的洗脱梯度条件进行分离,优化二维液相色谱分离条件并与传统凝胶双向电泳进行了比较,另外还对二维液相色谱的重现性和准确性进行了检验.实验建立了利用二维液相色谱分离羊草总蛋白的技术方法.
The Application of Two-dimensional Liquid Phase Chromatography to Separation of Total Protein of Leymus chinensis Shoot

解莉楠、聂玉哲、张晓磊、陈腾祥、刘靖华、姜勇、李玉花

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东北林业大学生命科学学院,哈尔滨,150040

南方医科大学病理生理教研室,广东省功能蛋白质组学重点实验室,广州,510515

羊草 二维液相色谱 色谱聚焦 无孔硅胶反相高效液相色谱 蛋白质表达谱

国家高技术研究发展计划(863计划)

2001AA246102

2007

植物生理与分子生物学学报
中国植物生理学会

植物生理与分子生物学学报

CSTPCD
ISSN：1671-3877
年,卷(期)：2007.33(3)
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