植物生理与分子生物学学报2007，Vol.33Issue(5) ：449-455.

一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法

A Simple Protein In-Gel Digest Method Compatible with Mass Spectrometry Analysis

王旭初 范鹏祥 李银心
植物生理与分子生物学学报2007，Vol.33Issue(5) ：449-455.
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一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法

A Simple Protein In-Gel Digest Method Compatible with Mass Spectrometry Analysis

王旭初 1范鹏祥 2李银心1
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作者信息

  • 1. 中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093
  • 2. 中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093;中国科学院研究生院,北京,100049
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摘要

在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法.改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性:(3)在预酶解时不加CaCl2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析.系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果.

关键词

蛋白质组/胶内酶解方法/双向电泳/肽质量指纹图谱/质谱分析

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基金项目

国家高技术研究发展计划(863计划)(2007AA091705)

中国科学院方向性项目(KSCX2-YW-N-013)

出版年

2007
植物生理与分子生物学学报
中国植物生理学会

植物生理与分子生物学学报

CSTPCD
ISSN：1671-3877
被引量13
参考文献量16
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