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一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法

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在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法.改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性:(3)在预酶解时不加CaCl2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析.系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果.
A Simple Protein In-Gel Digest Method Compatible with Mass Spectrometry Analysis

王旭初、范鹏祥、李银心

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中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京,100093

中国科学院研究生院,北京,100049

蛋白质组 胶内酶解方法 双向电泳 肽质量指纹图谱 质谱分析

国家高技术研究发展计划(863计划)中国科学院方向性项目

2007AA091705KSCX2-YW-N-013

2007

植物生理与分子生物学学报
中国植物生理学会

植物生理与分子生物学学报

CSTPCD
ISSN:1671-3877
年,卷(期):2007.33(5)
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