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Wnt/GSK3β/β-catenin信号通路参与PC12细胞糖氧剥夺再灌注中自噬与凋亡的调控

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目的:观察Wnt/GSK3β/β-catenin信号通路各位点在PC12细胞糖氧剥夺再灌注过程中的变化,探索Wnt/GSK3β/β-catenin是否参与PC12细胞糖氧剥夺后自噬及凋亡过程。方法:将培养至成熟后的PC12细胞糖氧剥夺1、2、3H(OGD1、2、3H)后给予再灌注2、4、8、12小时(R2H、R4H、R8H、R12H)。CCK-8方法检测不同时限糖氧剥夺组再灌注组各时间点PC12细胞增殖率。确定OGD2H组PC12细胞作进一步实验,以免疫印迹方法(westernblot)检测OGD2H组再灌注各时间点Wnt、GSK3β、β-catenin蛋白以及自噬标志蛋白LC3Ⅱ的表达变化;同时用流式细胞仪测试灌注不同时间点早中晚PC12细胞凋亡率。结果:1)随着OGD时间延长,PC12细胞的增殖率逐渐降低;不同OGD组于再灌注4H内均处于平台期,而R4H后,细胞活性明显降低。2)Wnt、GSK3β、β-catenin蛋白在OGD2H组PC12细胞再灌注0-4H平行降低,在R4-8H表达逐渐增加;而自噬标志蛋白LC3Ⅱ表达趋势与Wnt、GSK3β、β-catenin蛋白相反,于再灌注0-4H逐渐上调,R4-8H表达减弱。3)流式细胞仪检测R4-8H凋亡早中晚期逐渐增多(P<0。05)。结论:在PC12细胞糖氧剥夺再灌注过程中,Wnt/GSK3β/β-catenin信号通路的激活与细胞凋亡正相关,与细胞自噬活动负相关。提示抑制Wnt/GSK3β/β-catenin信号通路的表达可能对缺氧神经元再灌注后的神经元有保护作用。
Autophagy and Apoptosis in PC12 Cells regulated by Wnt/GSK3β/β-catenin signalway after Oxygen-Glucose Deprivation and Reperfusion

陈艾、陈芷

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西南医科大学附属医院儿科 四川泸州 646000

西南医科大学护理学院2014级高职一班 四川泸州 646000

Wnt/GSK3β/β-catenin信号通路 自噬 凋亡PC12细胞 糖氧剥夺再灌注

1)教育厅-四川省医事卫生法治中心课题:2)四川省教育厅项目:3)四川省卫计委重点项目:4)西南医科大学研究生教育教学改革研究重点课题:

YF18-Y2617ZB047015018编号2015-04

2018

中外医药研究

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ISSN:
年,卷(期):2018.1(30)
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