摘要
磷酸肌醇特异性磷脂酶C(Phosphoinositide-specific phospholipase C，PI-PLC)是一类重要的磷酸肌醇信号途径中的酶。将已克隆的磷酸肌醇特异性磷脂酶C基因（PtoPLC4, GeneBank No. JX861370）的编码区插入到原核表达载体pET28a上，经酶切和测序鉴定，成功获得了读码框正确的磷脂酶C原核表达载体（pET28-PtoPLC4）；再将表达载体转化大肠杆菌表达菌株BL21（DE3），经IPTG诱导后发现该重组蛋白主要以包涵体的形式存在。采用亲和纯化从可溶性蛋白中纯化到大小为64KD的蛋白条带。Western-Blotting分析亲和纯化所得蛋白可以与His单克隆抗体发生免疫交叉反应，表明纯化所得蛋白是PtoPLC4重组蛋白。该结果为进一步研究PtoPLC4的生物学功能奠定了基础。
中国科技论文在线