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水稻齿叶矮缩病毒P8蛋白的抗体制备及其在水稻原生质体内的表达动态

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水稻齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus, RRSV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)水稻病毒属(Oryzavirus)的成员。该病毒引起的水稻齿叶矮缩病在我国南方发病严重,成为我国水稻生产上的重要病害。本文通过建立水稻原生质体培养体系,对RRSV主要外壳蛋白P8在水稻原生质体内的复制与表达情况进行研究。通过原核表达对P8蛋白进行了抗体制备,抗血清经Western blot检测具有特异性,间接ELISA测得其效价为2500倍左右。以制备的抗血清为探针,通过Western blot检测到P8基因在病毒侵染原生质体后24 h开始表达,48 h左右达到最大值;同时,利用荧光定量PCR技术,对病毒侵染水稻原生质体后的P8 RNA含量进行检测,结果表明,P8 RNA在8 h时开始积累,32 h左右达到最大值,此后开始下降,但仍保持在较高水平。
Preparation of polyclonal antibody against P8 protein of Rice ragged stunt virus and its expression dynamic trends in rice protoplast

Rice ragged stunt virusrice protoplastantibody preparationreal time PCRWestern blot

林文武、陈晓敏、宛柏杰、吴锦鸿、张洁、吴祖建

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水稻齿叶矮缩病毒 水稻原生质体 抗体制备 荧光定量PCR Western blot

首发时间:2015-10-09