斜纹夜蛾SlGNBPⅡ基因的克隆及其功能的RNAi研究

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中文摘要：革兰氏阴性菌结合蛋白（Gram-negative bacteria binding protein ，GNBP）是一种模式识别受体，能够识别LPS 和β-1,3-葡聚糖，并参与激活Toll 和 Imd信号途径。本文利用同源克隆结合RACE技术首次克隆了斜纹夜蛾(Spodoptera litura Fabr.)Gram-negative bacterial binding proteinⅡ(GNBPⅡ)基因的cDNA序列（GenBank登录号： AEQ33590, SlGNBPⅡ ），其开放阅读框序列为1431bp，编码476个氨基酸，分子量为53.96 kDa，等电点为5.59。为了研究SlGNBPⅡ在活体内的功能，本文选取四龄第3天幼虫，注射3μg 的SlGNBPⅡdsRNA，分别利用半定量RT-PCR和Real-time PCR 进行RNAi检测，结果表明，注射SlGNBPⅡdsRNA 4、6、12、24 hr后，mRNA水平降低，说明SlGNBPⅡ被部分的沉默。为了进一步检测SlGNBPⅡ在免疫信号传导过程中的功能，利用斜纹夜蛾体内的抗菌肽基因作为检测靶标，RT-PCR检测表明抗菌肽基因Cecropin A，Cecropin B和moricin基因mRNA 丰度降低。以上结果为进一步研究SlGNBPⅡ与先天免疫密切相关的分子机制奠定基础。

外文标题：Molecular cloning and functional research of Gram-negative bacterial binding protein II gene by RNAi from Spodoptera litura

外文关键词：

Spodoptera lituraGram-negative bacterial binding proteinⅡ (GNBPⅡ)gene cloningRNAi

作者：

徐英杰、许小霞、黄寿山、王爽、金丰良、韩鹏飞

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学科分类：

生物科学(分子生物学)

生物科学(昆虫学)

关键词：

斜纹夜蛾革兰氏阴性菌结合蛋白Ⅱ 基因克隆 RNAi

首发时间：2012-06-20