猪瘟病毒野生株和疫苗株荧光RT-PCR鉴别方法的建立

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中文摘要：为了建立猪瘟病毒野生株和疫苗株荧光RT-PCR鉴别方法，设计了1对通用引物和2条特异性MGB探针。此外，为防止假阴性结果出现，制备了假病毒用于全程检测监控。测试了本方法的特异性，灵敏度，重复性等技术指标。结果显示，在选定的猪病相关病毒组内特异性符合率达100%；对野毒株和疫苗株的检测灵敏度分别达到1 TCID50/mL 和0.1 TCID50/mL；重复性实验表明组内和组间变异系数均在0.7%~2.2%之间。临床比对试验结果显示, 荧光RT-PCR对猪肉、脾脏和血液病料进行猪瘟野毒检测的阳性率分别为66.7%、60.0%、77.8%，而传统方法的阳性率分别为52.4%、40.0%、50.0%；检出率比传统方法要高。此外，临床试验样本中，PCR抑制物在猪肉、脾脏和血液病料中存在的比例分别为9.5%、10.0%和5.6%，显示了假病毒作为内标对PCR检测监控的重要作用。

外文标题：evelopment of Real-time RT-PCR based on MGB Fluorescence Probe for Differentiation of Wild-type and Vaccine Viruses of Classical Swine Fever Virus

外文关键词：

VirusesC-strain vaccinePolymerase chain reactionpseudovirusdetectionfluorescence

作者：

赖富饶、黄韵、章丽、吴晖、余以刚、杨锡洪、肖性龙、陶文扬

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学科分类：

生物科学(生物科学研究方法、生物科学研究技术)

生物科学(微生物学)

关键词：

猪瘟病毒猪瘟弱毒疫苗株荧光RT-PCR 假病毒检测荧光

首发时间：2013-05-21