家蚕BmNADHb5的表达分析及其亚细胞定位

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中文摘要：从本实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中[2]获得一条438 bp的基因序列（基因登号：:EU826676），序列比对后推测它是NDUF-b5家族的一个亚基，将其命名为BmNADHb5，可能与糖酵解和细胞呼吸作用中的柠檬酸循环有密切关系。在E.coli Rosetta中过度表达重组的BmNADHb5。采用亲和层析的方法纯化融合蛋白BmNADHb5，并用BmNADHb5蛋白免疫雄新西兰大白兔，进行多克隆抗体制备。间接 ELISA 法检测效价在1:12800 以上，用ELISA半定量法和Western blot检测抗体在各组织和各时期的表达。五龄幼虫的各组织器官的转录水平在气管中表达量最高,而在丝腺中最低。在家蚕的不同发育时期中,转录水平最高为卵期，而蛾则最低。同时利用免疫荧光PCR技术检测该基因在家蚕不同发育时期和五龄幼虫不同组织器官的转录水平，显示它在不同发育时期和五龄幼虫不同组织器官中均有转录。亚细胞定位，BmNADHb5存在于细胞质中，推测可能包括细胞质中线粒体等细胞器的质膜。

外文标题：Expression analysis and subcellular localization of the BmNADHb5 gene from silkworm, Bombyx mori

外文关键词：

ELISAWestern blotReal-time PCRsubcellular localization

作者：

张耀洲、李婷婷、陈健

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学科分类：

生物科学(分子生物学)

生物科学(细胞生物学)

生物科学(昆虫学)

关键词：

ELISA Western blot 荧光定量PCR 亚细胞定位

首发时间：2009-12-07