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表达嵌合抗原受体Jurkat细胞株的筛选及功能研究

Screening and Functional Research on Jurkat Cell Strain of Stable Chimeric Antigen Receptor Expression

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目的:血管内皮生长因子(VEGF)在各种人类实体瘤中过表达,本课题拟获得对VEGF有明显趋向性的T细胞株,为后继细胞治疗提供理论基础。方法:合成针对VEGF的嵌合抗原受体基因结构,克隆入慢病毒载体;三质粒磷酸钙法共转染293T细胞,收集病毒后感染Jurkat细胞;经G418筛选及克隆挑选得到稳转细胞株;PCR及流式细胞术检测筛选细胞株中目的基因的整合与表达;Transwell实验检测所筛选的细胞株对VEGF的趋化效果。结果:琼脂糖凝胶电泳显示慢病毒载体pLV120gn-FLT1CAR构建正确;PCR及流式细胞术表明FLT1CAR已经整合到Jurkat细胞中并稳定表达;趋化实验表明筛选的细胞株Clone1、Clone2对VEGF有显著趋化效果。结论:本文成功筛选到稳定表达FLT1CAR的细胞克隆,并且此细胞克隆对VEGF有明显的趋向作用。

molecular biologyVEGFchimeric antigen receptorJurkat

朱洋洋、刘辉、钱其军、汪毕、王颖

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分子生物学 VEGF 嵌合抗原受体 Jurkat

首发时间:2013-02-23