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钙网蛋白与OVA融合蛋白的纯化及其生物学功能
Purification and biological function of fusion protein of ovalbumin and calreticulin
高晓明 董红亮 龚政 龚方苑
摘要
为原核表达纯化钙网蛋白分子CRT与模型抗原鸡卵清白蛋白(OVA)片段的融合蛋白,并初步探究其生物学活性。现通过重叠PCR方法人工构建CRT-peptide复合物OVA161-276-CRT39-272载体,在基因工程菌中诱导表达后,通过Ni2+亲和层析的方法纯化出目的蛋白,并考察了融合蛋白对树突状细胞功能的影响,初步探究其生物功能。结果显示,正确构建好载体且所纯化融合蛋白纯度超过95%,融合蛋白相对于作为对照的OVA片段能促进树突状细胞的成熟和细胞因子的释放。表明OVA161-276-CRT39-272融合蛋白确具有一定的生物学活性,为下一步探究奠定基础。
关键词
免疫学/钙网蛋白/融合蛋白/树突状细胞Key words
immunology/calreticulin/fusion protein/dendritic cell引用本文复制引用
学科分类
生物科学(生物工程学)/生物科学(分子生物学)/生物科学(生物化学)