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钙网蛋白与OVA融合蛋白的纯化及其生物学功能

Purification and biological function of fusion protein of ovalbumin and calreticulin

高晓明 董红亮 龚政 龚方苑

钙网蛋白与OVA融合蛋白的纯化及其生物学功能

Purification and biological function of fusion protein of ovalbumin and calreticulin

高晓明 董红亮 龚政 龚方苑
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摘要

为原核表达纯化钙网蛋白分子CRT与模型抗原鸡卵清白蛋白(OVA)片段的融合蛋白,并初步探究其生物学活性。现通过重叠PCR方法人工构建CRT-peptide复合物OVA161-276-CRT39-272载体,在基因工程菌中诱导表达后,通过Ni2+亲和层析的方法纯化出目的蛋白,并考察了融合蛋白对树突状细胞功能的影响,初步探究其生物功能。结果显示,正确构建好载体且所纯化融合蛋白纯度超过95%,融合蛋白相对于作为对照的OVA片段能促进树突状细胞的成熟和细胞因子的释放。表明OVA161-276-CRT39-272融合蛋白确具有一定的生物学活性,为下一步探究奠定基础。

关键词

免疫学/钙网蛋白/融合蛋白/树突状细胞

Key words

immunology/calreticulin/fusion protein/dendritic cell

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学科分类

生物科学(生物工程学)/生物科学(分子生物学)/生物科学(生物化学)
首发时间 2016-06-01
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