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正常兔膝关节软骨细胞体外培养体系的建立和鉴定
Establishment and Identification of chondrocyte in knee of rabbit by vitro culture system
裴福兴 朱芸
摘要
目的：建立兔膝关节软骨细胞体外培养体系并鉴定，为后续研究提供细胞来源。方法：无菌条件下手术，切取新西兰大白兔双膝关节股骨髁及胫骨平台全层软骨，采用胰酶及II型胶原酶顺序消化法获得软骨细胞，在含10%FBS的DMEM低糖培养液中培养和传代。选取传一代软骨细胞行甲苯胺蓝、番红O、II型胶原染色鉴定；MTT法检测细胞增殖。结果：原代培养12小时后细胞开始贴壁，24小时后全部贴壁，48小时后细胞数目增多，呈多角型不规则状，3-4天增殖迅速，可见大量细胞集落，5天左右细胞融合，长满培养瓶底。一般6-7天细胞融合达80%时传代，传二代后细胞开始肥大，生长变慢。甲苯胺蓝、番红O、II型胶原染色均呈阳性。MTT检测细胞在第4天开始进入对数生长期，第8天进入平台期。结论：本实验方法可以成功获得软骨细胞并传代培养，所获软骨细胞经染色鉴定呈阳性。细胞在第4天进入对数生长期，传二代后细胞开始去分化。
关键词
软骨细胞/原代培养/鉴定Key words
chondrocytes/Primary culture/identification引用本文复制引用
学科分类
医药卫生(基础医学)/生物科学(细胞生物学)