摘要
本研究以多年来我国使用广泛、安全有效的鸭瘟病毒弱毒活疫苗作为载体,利用鸭瘟病毒多片段拯救系统筛选出更多可供外源基因插入的复制非必需区,在此基础上,根据我国目前流感病毒流行趋势筛选出种毒株,构建禽流感重组鸭瘟病毒疫苗株;同时,在此基础上利用基因重组技术构建表达新城疫、鸭病毒性肝炎以及鸭坦布苏病毒等保护性抗原的重组疫苗,并开展弱毒疫苗免疫佐剂相关研究。本研究已成功构建表达一价、二价和三价H5和H7亚型禽流感病毒 HA 基因的重组鸭瘟病毒疫苗株;1 株新城疫重组鸭瘟病毒活载体弱毒活疫苗株(rDEV-F);1株表达小鹅瘟 VP2 蛋白的重组鸭瘟病毒疫苗株;2 株分别表达鸭坦布苏病毒 E 蛋白以及 E蛋白融合 CD154 蛋白的重组鸭瘟病毒活疫苗株(rDEV-dTE和 rDEV-dTE154),以上重组鸭瘟病毒疫苗株均具有良好的遗传稳定性和安全性,且能提供良好的免疫保护。本研究对复合疫苗佐剂配方的研究结果证明桔梗总皂苷+多肽和远志总皂苷+多肽制备的新型免疫刺激复合物佐剂,其对机体的免疫调节作用优于桔梗总皂苷+多肽和远志总皂苷+多肽的复合佐剂。卡波姆+ISCOM(PTS+PP)佐剂组和卡波姆+ISCOM(PGS+PP)佐剂组免疫效果基本优于 ISCOM(PTS+PP)佐剂组和 ISCOM(PGS+PP)佐剂组,这可能与卡波姆的性质有。