摘要
食品中微生物毒素污染等食品安全事关国计民生和人民的身体健康，但精准检测技术缺乏。为了提高检测的灵敏度和特异性，利用基于人工抗体、单克隆抗体、适体、荧光抗体的综合检测技术建立了针对黄曲霉毒素 AFB1、锗曲毒素 OTA、玉米赤霉烯酮ZEN、桔青毒素、展青毒素等一系列特异性检测方法。（I）OTA-BSA作为免疫原免疫BALB/c小鼠，应用杂交瘤细胞融合技术制备单克隆抗体。经筛选，获得了一株可分泌高亲和性抗体的杂交瘤细胞株2D8，亲和常数为3.75×109L/M。OTA-OVA作为包被抗原，建立间接竞争ELISA检测方法，其半数抑制率（IC50）为7.6μg/kg，检测限（LOD）为1.4μg/kg，检测区间（IC20-IC80）为2.4-23.6μg/kg，玉米、小麦和大豆样本中的回收率在检测区间内可达91.2-110.3%。（II）基于磁珠和生物素链霉亲和素生物建立的检测ZEN方法（MNP-bsELISA），在最佳反应条件下，标准抑制曲线为y=-0.4287x+0.3132 (R2=0.9904)，其半数抑制率（IC50）为0.37ng/ml，检测区间即线性范围（IC20-IC80）为0.07-2.41ng/ml，检测限为0.04 ng/ml。经测定，批内和批间针对玉米样本中的回收率在检测区间内可分别达92.8-111.9%和91.7%-114.5%。（III）采用一步法合成了高荧光量子效率的碳点材料，并将其作为传感核心元件，结合分子印迹技术与非水溶胶-凝胶过程，将表面带有Si-O基团的碳点有效组装到聚合物矩阵中合成了一种兼具高选择性及高灵敏性的新型CDs@MIP传感材料，应用于真菌毒素ST的检测，在0.05–2.0 mg L-1的浓度范围内呈现线性下降，CDs@MIP用作传感材料对ST的检出限为19.0 μg L-1 (S/N=3), 五次重复测量ST (0.10 mg L-1)的相对标准偏差为2.31%。这些方法的研制为我国食品中微生物毒素的精准检测提供了技术储备，对于保障食品安全和公共卫生具有重要意义。
NSTRS