本研究建立并证实了转基因定点整合山羊的制备技术,利用该技术获得了乳腺特异高表达人血清白蛋白的转基因山羊(表达水平为2.03g/L)和Nramp1基因定点整合山羊。目前数据表明,该系统细胞水平的定点整合效率≥10%,成活体细胞克隆羊出生率≥10%。人血清白蛋白转基因山羊已获农业部转基因安全管理办公室批准进入中间试验;同时本研究对比了三种标记基因删除方法,确定在转基因山羊的成体细胞中删除SMGs成功率高,缺点是试验周期长、耗资增大。建立了通过连续克隆方法获得了无标基因的定点整合山羊成纤维细胞株的技术体系,并却确定克隆羊的60天妊娠率为50%,但因连续克隆效率低未获得成活个体。本研究完成了2种Nramp1定点整合转基因构件,获得了Nramp1定点整合转基因公山羊1头。获得了无标记基因的Nramp1基因定点整合山羊胎儿成纤维细胞,连续克隆后的60天妊娠率为50%,未获得成活转基因克隆羊。Nramp1转基因山羊生长发育和血液生化指标较正常羊无显著差异。初步建立了山羊血液中性粒细胞转化成巨噬细胞的技术;完成了细胞水平Nramp1表达框架的抗巨噬细胞内寄生菌的功能验证,表明山羊Nramp1基因在巨噬细胞内过表达可显著提高巨噬细胞的吞噬活性,可显著提高对沙门氏菌的细胞内杀伤活性。