NSTRS
生物质定向酶解关键技术
李多川 1仪宏 2冯玉杰 3陈少林4
作者信息
- 1. 山东农业大学
- 2. 河北科技大学
- 3. 哈尔滨工业大学
- 4. 西北农林科技大学
- 折叠
摘要
（一）建立了纤维素酶及高活性菌株的高通量筛选方法，利用该方法可以从微生物和突变库中有效筛选目的突变体，为高通量筛选高活性纤维素酶菌株及突变体奠定了基础。（二）从嗜热真菌中克隆纤维素氧化酶基因并表达，它们能够显著高效降解纤维素，为纤维素的高效酶解提供了一条新的途径。（三）利用转录组技术，研究了2种嗜热真菌在纤维素诱导条件下的基因表达情况。发现了很多与纤维素降解有关的基因，包括已知功能的基因和未知功能的基因。基因涉及糖苷水解酶、氧化还原酶、运转体、转录因子、假象蛋白等。研究为进一步深入纤维素的酶解机制、明确纤维素酶与其它酶的相互关系、发现降解纤维素的新基因等奠定了基础。（四）研究了纤维素酶酵母工程菌的中试最佳发酵条件和纤维素酶最佳作用条件以及酶制剂产品的研制，为纤维素酶的应用奠定了基础。(五)借鉴酿酒酵母利用重组酶表达质粒的无痕基因敲除方法，将重组酶CRE整合到毕赤酵母的染色体上，构建了毕赤酵母表达宿主底盘细胞；通过异源重组表达多个稀有糖苷酶、酯酶及木素氧化酶等基因，组织构建“辅助酶组”，建立生物质定向协同酶解关键技术，大幅度提高生物质酶解效率。（六）通过间歇式水热法处理玉米秸秆，预处理后纤维素酶解率显著提高。（七）借助粗糙脉孢菌的研究，深入了解丝状真菌表达分泌植物细胞壁降解酶的诱导和调控机制。利用定量蛋白组学方法，分析测定了植物细胞壁主要成分，包括纤维素及其衍生物如纤维二糖，对粗糙脉孢菌体内蛋白表达和蛋白磷酸化的影响，特别是差异性表达和差异性磷酸化的影响。
关键词
高通量筛选/糖苷酶/纤维素氧化酶/转录组分析/蛋白组分析/酵母基因工程菌中试/生物质预处理/嗜热真菌引用本文复制引用
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123报告类型
进展报告编制时间
2015-12-15立项年
2015