为了建立鱼骨钙肽螯合物制备的关键技术体系，本课题以我国大宗海洋水产品加工副产物—鱼骨为研究开发对象，针对其理化特性及质构特点，重点研究鱼骨高温高压软化技术等，以便于有效提取蛋白质；利用热力提取技术，超高速离心技术制备优质鱼骨蛋白质中间体；采用生物传感器与神经网络建立酶解进程的在线监控技术体系，靶向制备目标功能肽；针对酶解产物盐分含量高的情况，研究功能肽的精制纯化技术；针对提取蛋白质后鱼骨粉的特性，形成了酸转化活性钙制备技术，成果如下： （1）确定了鳕鱼骨预处理技术与蛋白分离参数，酶工程技术分离杂蛋白，高温高压120℃处理30min，粉碎，料液比1:5，提取温度70℃，提取时间6h，鳕鱼骨蛋白的提取率可达到93.57%。 （2）利用人工神经网络（BP-ANNs）和生物传感器，建立了三个可在动态变化条件下实现在线监测的网络模型分别为：GLU-BP-ANNs的动态监控模型，LYS-BP-ANNs的动态监控模型，GLU-LYS- BP- ANNs的动态监控模型。三个模型的样本值与拟合值相比较，R2值分别为0.9967、0.9964、0.9967，拟合误差范围分别为0-4.14%、0-4.56%、0-4.71%，拟合平均相对误差值分别为1.06%、0.94%、0.99%。利用模型进行验证实验表明，理论值与实验值相符合，试验的相对误差范围分别为0.23%-2.81%，0.26%-1.91%和0.30%-2.35%。三个模型在一定程度上实现了仿真监控，可以用来监测水解反应的进程。 （3）采用DA201-C树脂对鳕鱼目标肽进行吸附，确定了静态吸附最佳条件为：温度25℃，pH 4.0，多肽浓度10 mg/mL，树脂质量与多肽体积比(g/mL) 2:1，吸附时间3 h，在此条件下，吸附率可达84.7%。由DA201-C树脂动态吸附与解析得到的精制多肽，脱盐率为98.1%，多肽回收率为90.3%。 （4）确定了最佳的钙提取条件，提取温度100℃，提取时间120min，酸混合比例1:2，酸质量分数15%，在此条件下钙提取率达到96.15%。
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