查看更多>>摘要:[目的]克隆月季(Rosa hybrida L.)RhMAX2A基因cDNA序列,分析其序列特征及其在不同组织中和去顶后的表达情况,为探究该基因在月季中的生物学功能及调控侧枝发生的转导机制提供理论支持.[方法]以月季品种滇红(Rosa hybrida'Dianhong')为材料,通过RT-PCR技术克隆RhMAX2基因的cDNA序列,利用生物信息学方法对其序列和所编码的蛋白质进行分析,利用烟草(Nicotiana tabacum)瞬时转化技术分析蛋白的亚细胞定位,同时采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其在不同组织中及去顶后的表达情况.[结果]RhMAX2A基因(GeneBank登录号为OP055810)cDNA序列长 1030 bp,编码 246 个氨基酸,该蛋白分子式为C2910H4793N1029O1244 S210,相对分子质量为 27.35 kD,总原子量为 3909;该蛋白不稳定系数为 53.07,脂肪系数为 106.30,GRAVY值为0.049,是一类不稳定亲水性蛋白;RhMAX2A蛋白的二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,且RhMAX2A为推定的F-box结构域,属于α/β水解酶家族.同源序列比对和系统进化树关系分析结果表明,RhMAX2A氨基酸序列(OP055810)与同属的古老月季品种月月粉(Rosa chinensis'Old Blush')氨基酸序列(XP_024283944.1)相似性最高,其次是同亚科的草莓(Fragria vesca subsp.vesca)(XP_004287076.1),三者亲缘关系较近.亚细胞定位结果显示,RhMAX2A编码蛋白位于细胞核.qRT-PCR检测结果显示,RhMAX2A基因在根、腋芽和节中表达,根中表达量最高,去顶处理显著上调RhMAX2A基因在根和腋芽中的表达.[结论]成功克隆了滇红RhMAX2A基因,其编码蛋白在细胞核上发挥作用,主要在根和腋芽中表达,且受去顶诱导上调表达.