查看更多>>摘要:目的:探讨miR-129-5p在脓毒症诱导的心脏炎症和功能障碍中的作用.方法:24只8周龄的C57/BL6雄性小鼠按随机数字表法随机分为正常(Normal)组、脂多糖(LPS)组、LPS+空病毒对照(minic-NC)组、LPS+miR-129-5p慢病毒(miR-129-5p minic)组,每组 6 只,采用腹腔注射LPS建立脓毒症小鼠模型.采用免疫组织化学染色检测配对盒基因 6(PAX6),全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB),TUNEL分析检测心肌凋亡情况.体外采用LPS诱导原代心肌细胞,模拟脓毒症引起的心功能不全.将细胞分为对照(Control)组、LPS+inhibitor-NC+si-NC组、LPS+inhibitor-NC+si-PAX6 组、LPS+si-NC+miR-129-5p inhibitor组、LPS+miR-129-5p inhibitor+si-PAX6组.采用TUNEL分析检测心肌细胞凋亡情况,Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、PAX6 和人锌指E盒结合同源盒 2(ZEB2)蛋白表达,实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6 和IL-1β水平.结果:动物实验结果表明,与Normal组相比,LPS组小鼠血清CK、CK-MB水平,心肌细胞横截面积,TUNEL阳性细胞、PAX6阳性细胞比例和PAX6 mRNA表达水平显著升高(P<0.05).与LPS组相比,LPS+miR-129-5p minic组CK、CK-MB水平,心肌细胞横截面积,TUNEL阳性细胞、PAX6 阳性细胞比例和PAX6 mRNA表达水平显著降低(P<0.05).体外细胞实验结果表明,与Control组相比,LPS+inhibitor-NC+si-NC组TUNEL阳性细胞比例,PAX6、ZEB2 蛋白表达水平,TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2 蛋白表达水平显著降低(P<0.05).与LPS+si-NC+miR-129-5p inhibitor组相比,LPS+miR-129-5p inhibitor+si-PAX6 组TUNEL阳性细胞比例,PAX6、ZEB2 蛋白表达水平,TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2 蛋白表达水平显著升高(P<0.05).结论:miR-129-5p可能通过调控PAX6/ZEB2 信号通路控制心肌炎症反应,并参与调节脓毒症诱导的心脏功能障碍.