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期刊信息/Journal information
南方农业学报
广西壮族自治区农业科学院
南方农业学报

广西壮族自治区农业科学院

李杨瑞

月刊

2095-1191

nfnyxb@163.com

0771-3243905、3244920

530007

广西南宁市大学东路174号

南方农业学报/Journal Journal of Southern AgricultureCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊是由广西农业科学院主办的综合性农业科技期刊，主要报道农业科研新成果、新技术、新方法，农业生产新经验、新产业等。
正式出版
收录年代

    贵州省威宁草海主要野生鱼类重金属含量及健康风险评价

    徐承香杨瑞泉巴家文柳希竹...
    3040-3048页
    查看更多>>摘要：[目的]了解贵州省威宁草海鱼类重金属含量水平,并进行鱼类食用安全性评价,为威宁草海的鱼类水生生态环境保护和食用安全性提供参考依据.[方法]选择黄颡鱼、鲫鱼、鲤鱼和花鳅为研究对象,测定分析其肌肉和内脏中的8种重金属含量,运用Pearson分析鱼体中重金属含量与生长参数和水体理化因子的相关性,并运用单因子污染指数法、综合污染指数法和目标危险系数法进行污染评价.[结果]4种鱼体中的重金属含量排序为Zn>Cu>Cr>Pb>As>Ni>Cd>Hg,对重金属的累积整体上表现为鲫鱼>鲤鱼>花鳅>黄颡鱼,与国家标准GB 2762—2017《食品安全国家标准食品中污染物限量》比较,除Cu、Hg、Zn、Ni和As外,其余重金属均超标.鱼体各组织的重金属含量总体表现为内脏>肌肉.鲫鱼和鲤鱼的重金属含量随年龄的增加而上升,花鳅的重金属含量则随年龄的增加而降低.Pearson相关分析结果表明,Zn和Cd与体重、Cu与体长呈显著正相关(P<0.05,下同);Hg与硝酸盐氮(NO3-N)呈极显著正相关(P<0.01);Cr与总磷(TP)和NO3-N呈显著负相关;Cu与TP呈显著正相关.单因子污染指数表明,除Hg外,其余重金属在鱼体中有污染状况;综合污染指数表明,花鳅的肌肉处于轻度污染水平,鲫鱼和鲤鱼的内脏分别处于重度和中度污染水平.健康风险评价显示4种鱼的单一重金属危害系数(THQ)和复合重金属危害系数(TTHQ)在成人和儿童中均小于1,儿童的THQ和TTHQ均大于成人.[结论]威宁草海鱼体内存在重金属含量超标现象,重金属污染主要元素是As,食用黄颡鱼、鲤鱼、鲫鱼和花鳅虽然不会造成潜在健康风险,但相关部门对鱼类重金属的污染应给予管控.

    鱼重金属污染健康风险评价威宁草海贵州省

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    玉米皮替代玉米粉对湘东黑山羊内脏脂肪组织脂肪代谢的影响

    王琪骆东梅王荣杨大盛...
    3049-3056页
    查看更多>>摘要：[目的]明确玉米皮替代玉米粉对山羊脂肪代谢的影响,为玉米皮在反刍动物养殖生产中的合理应用提供参考依据.[方法]选择10月龄左右、体重(17.50±2.67 kg/只)相近的健康雄性湘东黑山羊20只,随机分成2组[玉米粉组(CM组)和玉米皮(CG组)],每组10只.山羊日粮精粗比为75:25,CM组饲喂基础饲粮,CG组饲喂以玉米皮完全替代玉米粉的试验饲粮.饲喂60 d后进行屠宰,迅速采集网膜脂肪组织(简称网膜脂)、肠系膜脂肪组织(简称系膜脂)和肾周脂肪组织(简称肾周脂),通过Agilent 7890A气相色谱仪和实时荧光定量PCR检测其脂肪酸组成及脂肪代谢相关基因的表达情况.[结果]与CM组相比,CG组山羊网膜脂中的豆蔻酸(C14:0)、十七烷酸(C17:0)、硬脂酸(C18:0)、反式油酸(C18:1n9t)及花生酸(C20:0)含量显著(P<0.05,下同)或极显著(P<0.01,下同)上升;系膜脂中的十七烷酸和α-亚麻酸(C18:3n3)含量显著上升,肉豆蔻酸含量显著下降;而肾周脂的脂肪酸组成无显著变化(P>0.05,下同).山羊内脏脂肪的饱和脂肪酸总含量、单不饱和脂肪酸总含量及多不饱和脂肪酸总含量在CG组与CM组间均无显著差异.在脂肪代谢相关基因表达方面,与CM组相比,CG组山羊网膜脂中的乙酰辅酶A羧化酶基因(ACC)极显著上调表达;系膜脂中的脂肪酸去饱和酶1基因(FADS1)极显著下调表达,锌指蛋白类转录因子2(KLF2)、锌指蛋白类转录因子4(KLF4)、胆固醇调节元件结合蛋白1基因(SREBP1)则显著上调表达;肾周脂中的SREBP1基因极显著下调表达.[结论]以玉米皮替代玉米粉会不同程度地影响湘东黑山羊内脏脂肪组织中某些脂肪酸含量及脂肪代谢相关基因表达,但对内脏脂肪组织的饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸及多不饱和脂肪酸含量均无显著影响,即以玉米皮代替玉米粉对山羊内脏脂肪组织脂肪酸组成的总体影响较小,可在实际生产中推广应用.

    湘东黑山羊玉米皮玉米粉脂肪酸组成脂肪代谢相关基因

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    特异性识别草鱼呼肠孤病毒感染细胞的ssDNA核酸适配体筛选与鉴定

    余庆刘明珠李梦梦肖贺贺...
    3057-3065页
    查看更多>>摘要：[目的]筛选出能高特异性和高亲和性识别草鱼呼肠孤病毒(GCRV)感染细胞的核酸适配体,为研发操作便捷、成本低、耗时短、准确度高的GCRV检测技术打下基础,同时为提高水产疫病检测及防控效率提供技术支持.[方法]以草鱼呼肠孤病毒I型(GCRVI)感染的宿主细胞为靶标,采用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)进行特异性核酸适配体筛选,并通过激光共聚焦显微技术和流式细胞术对筛选获得的核酸适配体性质进行系统分析.[结果]筛选获得的核酸适配体GVIK1能特异性识别并结合在GCRVI感染的草鱼肾脏组织细胞系(CIK)表面,但不识别正常的CIK细胞及石斑鱼神经坏死病毒广西株(GNNV)感染的石斑鱼脾细胞(GS);其二级结构具有独特复杂的茎环结构,吉布斯自由能(△G)为-32.93 kJ/mol,无细胞毒性.核酸适配体GVIK1结合靶标细胞的亲和常数(Kd)为148.22 nmol/L,即核酸适配体GVIK1与靶标细胞间的亲和力极强,达纳摩尔级别.核酸适配体GVIK1在靶标细胞表面的结合位点是细胞膜蛋白或膜蛋白相关结构,其在靶标细胞表面的结合位点出现在病毒感染后的第5h.临床试验结果表明,筛选获得的核酸适配体GVIK1可作为高特异性分子探针用于诊断GCRV感染所致的草鱼出血病.[结论]基于SELEX技术筛选获得能特异性识别GCRVI感染宿主细胞的核酸适配体GVIK1,可作为核酸分子探针用于研发操作便捷、成本低、耗时短、准确度高的GCRV快速检测技术,实现实时监测和有效防控.

    草鱼呼肠孤病毒(GCRV)指数富集的配体系统进化技术(SELEX)核酸适配体靶蛋白

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    猪miR-124靶向IQGAP2调节巨噬细胞内沙门氏菌的增殖

    陈旺邓榆殷俊官州...
    3066-3072页
    查看更多>>摘要：[目的]明确猪miR-124与其靶基因IQGAP2间的表达调控关系,以及miR-124表达水平与猪巨噬细胞内沙门氏菌数量的关联,为揭示沙门氏菌在感染细胞内存活与增殖的机制提供理论依据.[方法]通过荧光素酶报告基因系统验证miR-124与IQGAP2基因的作用位点;再以GM-CSF诱导的猪巨噬细胞和鼠伤寒沙门氏菌(ATCC 14028)为试验材料,通过实时荧光定量PCR和流式细胞术测定沙门氏菌感染猪巨噬细胞中miR-124和IQGAP2基因的表达及巨噬细胞内沙门氏菌的增殖情况.[结果]miR-124结合位点野生型载体转染的荧光报告信号显著低于miR-124结合位点突变载体(P<0.05,下同),但共转染anti-miR-124序列后能显著增强miR-124结合位点野生型载体的荧光报告信号.经沙门氏菌感染后,猪巨噬细胞中的miR-124表达被激活,感染12、24和48 h后的相对表达量均显著高于沙门氏菌感染前(0 h),而IQGAP2基因表达水平呈显著下调趋势;在沙门氏菌感染猪巨噬细胞内,miR-124表达水平与IQGAP2基因表达水平呈明显负相关(r=-0.92).miR-124高表达组细胞内的沙门氏菌数量显著高于正常巨噬细胞,但miR-124敲低表达组细胞内的沙门氏菌数量显著低于正常巨噬细胞;IQGAP2基因敲低表达组细胞内的沙门氏菌数量显著高于正常巨噬细胞;此外,miR-124高表达+IQGAP2基因敲低表达组细胞内的沙门氏菌数量与IQGAP2基因敲低表达处理组相比无显著差异(P>0.05),但显著高于miR-124高表达组细胞.[结论]沙门氏菌感染猪巨噬细胞中的miR-124表达水平与IQGAP2基因表达水平及胞内沙门氏菌数量呈负相关,即沙门氏菌可通过上调miR-124表达靶向抑制IQGAP2基因表达,从而调节其在猪巨噬细胞内的增殖.

    猪沙门氏菌miR-124IQGAP2基因胞内增殖流式细胞术荧光素酶报告基因系统

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    罗非鱼不同养殖阶段喹诺酮类耐药菌群数量与组成分析

    吴甘林邓玉婷张瑞泉谭爱萍...
    3073-3082页
    查看更多>>摘要：[目的]评估不同养殖阶段罗非鱼肠道及养殖环境中喹诺酮类耐药菌产生的风险,筛选出水产养殖耐药性监测指示菌,为建立科学的水产品耐药防控技术提供参考依据.[方法]选取萘啶酸(第一代)和恩诺沙星(第三代)2种喹诺酮类药物,通过平板计数法统计不同养殖阶段(苗种阶段、中间阶段及上市阶段)罗非鱼肠道及养殖环境(池塘水和底泥)中喹诺酮类耐药菌的数量及耐药率,然后采用高通量测序分析不同养殖阶段喹诺酮类耐药菌群的结构特征及组成变化.[结果]在不同养殖阶段罗非鱼肠道及其养殖环境中的细菌总数相对稳定,罗非鱼肠道的细菌总数维持在4.6×105～1.6×106 CFU/g,池塘水的细菌总数维持在5.2×103～2.1×104 CFU/g,池塘底泥的细菌总数维持在4.8×103～3.2×104 CFU/g.苗种阶段罗非鱼肠道菌群对萘啶酸和恩诺沙星的耐药率均高于中间阶段和上市阶段,分别为34.7％和19.0％.各养殖阶段的罗非鱼肠道及养殖环境优势菌群均以气单胞菌属、埃希菌—志贺氏菌属、鲸杆菌属、邻单胞菌属、芽孢杆菌属和肠杆菌属细菌为主.随着养殖阶段的推移,罗非鱼肠道中的气单胞菌属相对丰度呈下降趋势,而鲸杆菌属呈上升趋势;而养殖环境中的菌群结构无明显规律性变化.在罗非鱼肠道及养殖环境喹诺酮类耐药菌群中,埃希菌—志贺氏菌属和气单胞菌属的相对丰度较高,且随着养殖阶段的推移呈不同程度上升趋势.[结论]罗非鱼养殖的耐药风险主要集中在养殖前期阶段,埃希菌属和气单胞菌属是喹诺酮类耐药的主要菌群,应加强不同养殖阶段的饲养管理,减少病害发生以减轻抗菌药物使用带来的风险.此外,可选用埃希菌属和气单胞菌属作为水产养殖细菌耐药性监测的指示菌,实时监控喹诺酮类药物耐药性的产生与传播.

    罗非鱼肠道养殖环境喹诺酮类药物耐药菌群

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    变异猪流行性腹泻病毒M和N双基因融合真核表达及其活性鉴定

    王隆柏陈秋勇吴学敏陈如敬...
    3083-3089页
    查看更多>>摘要：[目的]体外表达变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的M-N双基因融合蛋白并明确其生物活性,为开展PEDV新型疫苗及其诊断技术研究提供更多的候选蛋白.[方法]将变异PEDV的M基因克隆至pEASY-Blunt M2(pM2)真核表达载体构建pM2-M真核质粒,通过同源重组将N基因克隆至M2-M基因片段构建pM2-M-N双基因融合重组质粒,然后转染293T细胞表达出M-N双基因融合蛋白.通过Western blotting、ELISA及免疫BLAB/c小鼠试验鉴定表达融合蛋白的生物学活性.[结果]扩增获得的M基因、N基因片段大小分别为678和1359 bp,且与原序列的相似性均达100.0％.将M基因和N基因并连接至pM2真核表达载体成功构建获得pM2-M-N双基因融合重组质粒,M-N双基因片段大小为2004 bp,且与原序列的相似性为99.3％.以pM2-M-N双基因融合重组质粒转染239T细胞,表达出大小约75 kD且具有免疫活性的M-N双基因融合蛋白,纯化的M-N双基因融合蛋白能与PEDV阳性血清反应,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等病毒均无交叉反应;以其免疫BLAB/c小鼠能诱导产生特异性抗体.[结论]通过pM2真核表达载体能构建获得变异PEDV毒株的pM2-M-N融合双基因重组质粒,转染293T细胞后可表达出具有良好免疫活性的M-N双基因融合蛋白,为后期开展变异PEDV基因工程疫苗及其诊断技术研究提供更多的候选蛋白.

    猪流行性腹泻病毒(PEDV)M基因N基因双基因融合蛋白

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    卵形鲳鲹MyoG基因克隆及其胚胎组织表达分析

    张永德冯鹏霏余艳玲潘传燕...
    3090-3098页
    查看更多>>摘要：[目的]明确卵形鲳鲹胚胎发育中肌细胞生成素基因(MyoG)的表达规律,为阐明MyoG在卵形鲳鲹胚胎生长发育中的作用机制打下基础.[方法]采用RT-PCR扩增卵形鲳鲹MyoG基因全长序列,通过ProtParam、GOR IV、SWISS-MODEL、TMHMM、SignalP、PSORT及NetNGlyc 1.0等在线软件对其进行生物信息学分析;运用实时荧光定量PCR检测MyoG基因在卵形鲳鲹不同胚胎发育时期(受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、胚胎形成期、眼囊期、耳囊期、心脏跳动期、晶体出现期和孵化期)的表达情况.[结果]从卵形鲳鲹胚胎组织中克隆获得的MyoG基因全长为1379 bp,编码233个氨基酸残基,其蛋白分子量为26059.19 Da,理论等电点(pI)为8.72;不稳定指数为75.23,即MyoG蛋白稳定性较差;总平均疏水指数(GRAVY)为-0.764,属于亲水性蛋白.卵形鲳鲹MyoG蛋白无跨膜结构,无信号肽序列,在第49位氨基酸处存在1个潜在的糖基化位点;卵形鲳鲹MyoG蛋白主要存在于细胞质和微体中,不属于分泌蛋白,其二级结构中以无规则卷曲占比最高(59.23％),其次为α-螺旋(21.46％)和延伸链(19.31％).MyoG基因相对表达量在卵形鲳鲹胚胎发育过程中呈明显的先升高后降低变化趋势.其中,在胚胎发育的前期(受精卵至胚体形成期)MyoG基因相对表达量极低,但从眼囊期开始其相对表达量迅速升高,至心脏跳动期达最高值;眼囊期、耳囊期和心脏跳动期3个时期的MyoG基因相对表达量均极显著高于胚胎发育前5个时期(P<0.01,下同);从晶体出现期开始,MyoG基因相对表达量极显著降低.[结论]MyoG基因除了在卵形鲳鲹眼囊期、耳囊期和心脏跳动期的分化形成过程中发挥重要作用外,在卵形鲳鲹胚胎器官分化形成后仍发挥着重要作用.

    卵形鲳鲹MyoG基因胚胎发育生物信息学表达分析

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    猪源IKKγ在原核和真核表达系统中的表达及其多克隆抗体制备

    赵祥秀黄茂发高跃美唐榕泽...
    3099-3108页
    查看更多>>摘要：[目的]制备猪源IKKγ多克隆抗体,为进一步研究IKKγ蛋白生物学特性及揭示IKKγ蛋白与猪瘟病毒(CSFV)间相互作用机制打下基础.[方法]利用RT-PCR从猪肾细胞(PK-15)中克隆原核表达的IKKγ基因功能片段(561 bp),与原核表达载体pET-32a(+)构建原核重组质粒pET-IKKγ,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后进行IPTG诱导表达,表达的融合蛋白经纯化和浓缩后,免疫小鼠制备猪源IKKγ多克隆抗体.同时克隆IKKγ基因全长序列(1356 bp),与真核表达载体pCMV-HA构建真核重组质粒pCMV-HA-IKKγ,分别转染293T细胞和PK-15细胞,检测融合蛋白表达情况.[结果]以原核重组质粒pET-IKKγ转化BL21感受态细胞,经IPTG诱导能表达出约40 kD的融合蛋白,且融合蛋白主要以可溶性蛋白形式进行表达,可通过Ni-NTA亲和层析柱进行纯化,已获得较高纯度的融合蛋白IKKγ.构建的真核重组质粒pCMV-HA-IKKγ能在293T细胞中成功表达出IKKγ蛋白;制备获得的猪源IKKγ多克隆抗体能与293T细胞表达融合蛋白IKKγ发生特异性反应,其抗体效价为1:16000,与PK-15细胞表达IKKγ蛋白也具有良好的反应性,其中CSFV感染后36 h是IKKγ蛋白表达高峰期.此外,制备获得的猪源IKKγ多克隆抗体能在PK-15细胞中成功检测到IKKγ蛋白,说明猪源IKKγ多克隆抗体与真核细胞瞬时表达的IKKγ蛋白特异性良好.[结论]制备获得的猪源IKKγ多克隆抗体具有效价高、特异性强等特点,可用于检测CSFV感染PK-15细胞中IKKγ蛋白表达水平,为下一步研究IKKγ蛋白生物学特性及揭示NF-κB信号通路转录调节功能机制提供技术支持.

    IKKγ猪瘟病毒(CSFV)原核表达真核表达多克隆抗体

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    家蚕卵形指数对孵化率的影响及孵化相关基因表达分析

    王雪珍徐娇王闪闪浦月霞...
    3109-3115页
    查看更多>>摘要：[目的]分析家蚕卵形指数对孵化率的影响规律,以及孵化酶基因(BmHE I和BmHE II)、几丁质酶基因(Chitinase)和周期蛋白基因(Period)在不同卵形间的表达规律,为阐明家蚕卵形指数与孵化率的相关性及其分子机理打下基础.[方法]调查家蚕Nistari品种野生型正常形品种(Nistari+)及其新突变体纺锤形品种(Nistari-)的卵形指数、孵化率、受精率和转青死卵率,分析其卵形指数与孵化率的相关性;并通过实时荧光定量PCR检测蚕卵胚胎发育后期孵化相关基因的表达情况.[结果]Nistari+蚕卵的平均卵形指数为1.26,极显著低于Nistari-蚕卵(1.73)(P<0.01,下同);孵化率为96.22％,极显著高于Nistari-蚕卵(51.33％).当Nistari+蚕卵的卵形指数为1.24～1.25时,其孵化率(97.39％)和受精率(98.84％)均最高,转青死卵率最低(2.61％);而Nistari-蚕卵的卵形指数为1.77～1.81时,其孵化率(56.52％)和受精率(74.87％)均最高,转青死卵率最低(43.48％).相关分析结果表明,Nistari蚕卵孵化率、受精率和转青死卵率与卵形指数存在一定的相关性,且受卵形指数影响.在蚕卵胚胎发育后期(孵化前),Nistari+蚕卵的BmHE I、BmHE II、Chitinase和Period基因大量表达,对应的相对表达量显著(P<0.05)或极显著高于NISTAR-蚕卵.[结论]家蚕Nistari品种的卵形指数与孵化率存在一定相关性,而BmHE I、BmHE II、Chitinase和Period基因的表达差异是导致Nistari-蚕卵与Nistari+蚕卵孵化率差异的分子基础.

    家蚕Nistari品种卵形指数孵化率孵化相关基因

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    甘草对尖吻鲈生长特性、消化酶及免疫酶的影响

    王一福周胜杰杨蕊于刚...
    3116-3125页
    查看更多>>摘要：[目的]探究添加不同水平甘草粉的饲料对尖吻鲈幼鱼生长特性、消化酶及免疫酶的影响,为甘草在尖吻鲈饲料中的添加应用提供参考依据.[方法]将甘草粉按不同比例添加至饲料中,然后对尖吻鲈幼鱼进行饲料投喂试验,添加量0％为对照组,1％、3％和5％为试验组,各组均设3个平行,试验周期56 d,测定淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)、胰蛋白酶(TRYP)、胃蛋白酶(PP)、总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)和溶菌酶(LZM)等指标,并对尖吻鲈消化酶指标与生长特性指标间、免疫酶指标与存活率间进行相关分析.[结果]3％和5％试验组尖吻鲈的存活率(SR)显著高于对照组(P<0.05,下同);各试验组的体长增长率(BLGR)均显著高于对照组;增重率(WGR)和特定生长率(SGR)在5％试验组显著升高;前肠AMS活力在3％和5％试验组显著升高;肝脏AMS、前肠LPS、肝脏LPS和胃LPS活力在各试验组均显著升高;前肠TRYP活力在1％和5％试验组显著升高;PP活力在5％试验组显著升高.WGR、SGR与肝脏AMS活力呈显著正相关.肝脏T-AOC活力在各试验组均显著升高,CAT活力、GSH-PX活力和POD活力在1％试验组显著升高,MDA含量在5％试验组显著下降;血清T-AOC活力和CAT活力在各试验组均显著升高,GSH-PX活力在3％试验组显著升高,LZM活力在1％和5％试验组显著下降.SR与肝脏T-AOC、肝脏T-SOD、血清T-AOC、血清CAT和血清GSH-PX活力呈显著正相关,与血清MDA含量及血清T-SOD活力呈显著负相关.[结论]饲料中添加3％～5％甘草粉可更好地提高尖吻鲈消化酶活性、促进鱼体增长,协助杀菌,提高尖吻鲈的存活率;添加1％～3％甘草粉可增强尖吻鲈抗氧化能力,减少肝过氧化物积累.因此,饲料中添加适量的甘草对尖吻鲈幼鱼具有促进消化及提高免疫的作用.

    甘草尖吻鲈生长特性消化酶免疫酶

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