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期刊信息/Journal information
南方农业学报
广西壮族自治区农业科学院
南方农业学报

广西壮族自治区农业科学院

李杨瑞

月刊

2095-1191

nfnyxb@163.com

0771-3243905、3244920

530007

广西南宁市大学东路174号

南方农业学报/Journal Journal of Southern AgricultureCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊是由广西农业科学院主办的综合性农业科技期刊，主要报道农业科研新成果、新技术、新方法，农业生产新经验、新产业等。
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    不同青贮玉米品种产量和青贮品质的综合评价

    李淑君袁亮祁志云杨华...
    2092-2100页
    查看更多>>摘要：[目的]探究品种对青贮玉米生物产量和青贮品质的影响,筛选出适宜在重庆地区种植的优良青贮玉米品种,为推动重庆地区草食畜牧养殖业健康稳定发展提供参考.[方法]以重庆市4个青贮玉米新品种(渝青玉3号、渝青386、渝青385和渝单58)为参试材料,雅玉青贮8号为对照品种(CK),收获期测定全株玉米生物产量,同时将全株玉米切碎青贮90d后测定青贮的营养成分和发酵品质;运用主成分分析及隶属函数分析法综合评价全株玉米青贮品质,结合生物产量筛选优良品种.[结果]各青贮玉米品种间生物产量差异明显,以渝青386鲜物质产量和干物质产量均为最高,较CK分别显著提高9.03%和10.56%(P<0.05,下同).品种间全株玉米青贮后营养成分差异明显.渝青386的粗蛋白含量最高,为8.43%,较渝单58和CK分别显著提高18.23%和17.08%,酸性洗涤纤维(ADF)含量最低,为20.33%,显著低于其他品种;渝青385的中性洗涤纤维(NDF)含量最低,为40.30%,较CK显著降低14.93%;渝单58的淀粉和水溶性碳水化合物(WSC)含量均最高,分别为37.90%和3.12%,均显著高于渝青玉3号、渝青385和CK.品种间各项发酵品质指标存在明显差异.渝青386的pH最低,为4.06,乳酸含量最高,为7.70%;渝青385的乙酸含量最高,为0.56%;渝单58的丙酸含量最低,为0.10%;渝青玉3号的氨态氮/总氮(NH3-N/TN)为11.45%,显著高于其他品种;所有品种均未检测到丁酸.所有品种全株玉米青贮V-Score评分均大于80分,为良好级,其中渝青386评分最高(93.4分).通过主成分分析提取3个主成分,累积贡献率为89.810%,反映原来14个指标的大部分信息.综合主成分分析及隶属函数分析发现,4个参试品种的青贮品质综合表现均优于CK,其中渝青386和渝青385平均隶属值大于0.50.[结论]在重庆地区种植渝青386,生物产量最高,且制作全株玉米青贮饲料效果较好,具有更高的推广价值.

    全株玉米青贮生物产量营养品质发酵品质主成分分析隶属函数分析

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    鸡SLC基因超家族分析及其在蛋壳形成不同时期的表达特征

    高志群虞霖田陆阳清
    2101-2114页
    查看更多>>摘要：[目的]鉴定出在蛋壳形成过程中可能参与钙转运的溶质载体(SLC)基因超家族成员,并分析SLC基因在蛋壳形成不同时期的表达特征,为进一步探究SLC基因与蛋壳形成的相关性及揭示钙转运调控机制打下基础.[方法]基于NCBI和Ensembl数据库,检索并整理鸡SLC基因超家族全基因信息,通过ProtParam、Pfam、TBtool、NPS@:SOPMA、Euk-mPLoc 2.0及MEGA 11.0等在线软件进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR分析钙转运相关SLC基因在蛋壳形成不同时期的表达特征.[结果]鸡SLC基因超家族包括56个亚家族,分布在包括Z染色体在内的32条染色体上,其编码蛋白主要分布在内质网和细胞膜上,大多数为疏水的碱性蛋白,涵盖81种结构域,主要参与核苷酸、糖类、氨基酸、神经递质、无机离子及有机离子等物质的运输,其中与钙离子(Ca2+)相关的SLC亚家族基因有SLC4、SLC8、SLC9、SLC24和SLC30.SLC8和SLC24亚家族基因在进化分支上的亲缘关系很近,存在直接与Ca2+转运的结构域,主要定位在细胞膜和内质网上.实时荧光定量PCR检测结果表明,控制Ca2+的SLC8和SLC24基因在产蛋鸡子宫部的表达显著高于未产蛋鸡(P<0.05,下同),进一步说明二者确实参与调控Ca2+跨膜运输,但各成员间分工有所不同.[结论]鸡SLC基因超家族编码产物多为疏水的碱性蛋白,含有结合多种物质的结构域,定位于细胞或多种亚细胞结构膜上,表明SLC家族蛋白成员参与多种物质的跨膜转运过程.其中,SLC8和SLC24亚家族基因在蛋壳形成过程中协同调控Ca2+从内质网释放并完成跨膜运输,分泌到输卵管子宫部而参与蛋壳的形成.

    鸡SLC基因超家族蛋壳形成钙转运表达特征

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    NEFA对牛骨骼肌细胞线粒体功能及脂肪酸代谢相关基因的影响

    黄泳杨艺赵颖付叶...
    2115-2125页
    查看更多>>摘要：[目的]明确非脂化脂肪酸(NEFA)胁迫对牛骨骼肌细胞线粒体功能及脂肪酸代谢过程的影响,为揭示围产期奶牛营养代谢病的作用机理提供参考依据.[方法]建立NEFA胁迫牛骨骼肌细胞模型,经最佳浓度—时间组合刺激后,采用透射电镜观察牛骨骼肌细胞线粒体的形态变化,通过油红O染色及BODIPY 493/503染色观察细胞内脂质沉积情况,采用流式细胞术检测线粒体膜电位,利用试剂盒检测细胞内的过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,并以实时荧光定量PCR检测线粒体功能及脂质代谢相关基因表达情况.[结果]综合NEFA对牛骨骼肌细胞存活率及其形态的影响,选取1.5 mmol/L NEFA刺激2h作为后续试验的最佳浓度—时间组合.经1.5 mmol/L NEFA刺激2h后,牛骨骼肌细胞线粒体体积变小、基质颜色加深,线粒体嵴排列紊乱,且趋向于融合现象,甚至部分呈空泡状;线粒体膜电位下降的细胞数量明显增多,较对照组(刺激0h)显著提高38.08%(P<0.05,下同);细胞培养上清液MDA含量较对照组(刺激0h)显著提高1.38倍,而细胞内的CAT活性极显著降低60.63%(P<0.01,下同),SOD活性显著降低34.21%.实时荧光定量PCR检测结果显示,经1.5 mmol/L NEFA刺激2h后,调控线粒体基因复制与转录的NRF1和PGC-1α基因、调控线粒体融合的MFN2基因、线粒体呼吸链关键酶基因(除COV基因外)、含Patatin样磷脂酶域2蛋白基因(PNPLA2)及长链脂酸延伸酶6基因(ELOVL6)的相对表达量均极显著降低,而肉毒碱脂酰转移酶1B基因(CPT1B)的相对表达量极显著提高.[结论]高浓度的NEFA对牛骨骼肌细胞具有脂毒性,对线粒体形态、功能与膜电位均产生影响,能引发线粒体功能障碍及导致细胞脂肪酸代谢异常,产生氧化应激,进而诱导脂质异常沉积.

    牛围产期非酯化脂肪酸(NEFA)骨骼肌细胞线粒体功能代谢异常

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    家蚕核型多角体病毒lef-8基因克隆及系统进化分析

    张永红杨大平许珍娣邵榆岚...
    2126-2134页
    查看更多>>摘要：[目的]了解云南省德宏州陇川县蚕区家蚕核型多角体病毒(BmNPV)株系的遗传地位和多样性,为厘清云南蚕区BmNPV的起源及科学防控家蚕血液型脓病提供参考依据.[方法]对分离自云南省德宏州陇川县蚕区的BmNPV进行lef-8基因克隆,通过ExPASy、SignalP 5.0、TMHMM 2.0、NetOGlyc 4.0、NetPhos 2.0及SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析,并基于lef-8基因核苷酸序列相似性,采用MEGA7.0中的邻接法(NJ)构建系统发育进化树.[结果]云南省德宏州陇川县蚕区BmNPV-YNLC株的lef-8基因序列全长2631 bp,共编码876个氨基酸残基;其编码蛋白(LEF-8)无信号肽序列,也不存在跨膜结构域,蛋白分子量为101.63 kD,理论等电点(pI)为8.8;在第750～800位氨基酸残基区域具有较高的疏水性,部分氨基酸位点表现为亲水性,且具有较高抗原指数和表面可及性;存在6个潜在的N-糖基化位点,62个磷酸化位点(25个丝氨酸磷酸化位点,23个苏氨酸酸化位点,14个酪氨酸磷酸化位点),但不存在O-糖基化位点.BmNPV-YNLC株与BmNPV-T3株的lef-8基因核苷酸序列相似性为99.7%,BmNPV-YNLC株lef-8基因在第96～98位核苷酸序列上存在3个碱基(CAA)缺失;此外,还存在2个非同义突变(646T→A和1895C→G)和7个同义突变.基于lef-8基因核苷酸序列相似性构建的系统发育进化树显示,BmNPV-YNLC株与日本和韩国地区的BmNPV亲缘关系较近,而与我国流行的BmNPV遗传关系较远.[结论]lef-8基因在不同地区来源的BmNPV株系中高度保守,BmNPV-YNLC株与日本和韩国地区的BmNPV亲缘关系较近,但其LEF-8蛋白N端存在氨基酸缺失突变,说明BmNPV-YNLC株为云南蚕区的新流行株系.

    家蚕家蚕核型多角体病毒(BmNPV)lef-8基因遗传多样性系统进化分析

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    狂犬病病毒脑内感染MyD88-/-小鼠对肺脏病理变化的影响

    凌小清蔡宗伶谭深根刘俊丹...
    2135-2145页
    查看更多>>摘要：[目的]明确狂犬病病毒(RABV)脑内感染MyD88基因敲除(MyD88-/-)小鼠对肺脏病理变化的影响,探索MyD88基因缺失对狂犬病发病进程的延迟作用,为进一步揭示RABV的致病机理打下基础.[方法]以RABV的弱毒株rRC-HL和标准强毒株CVS-24分别脑内感染MyD88-/-和野生型(MyD88+/+)小鼠,攻毒剂量1000 FFU/只,以相同方式和剂量接种DMEM作为对照.观察脑内感染后小鼠的临床症状及体质量变化,采集脑内感染后第4和7d的脑组织和肺脏,通过实时荧光定量PCR检测小鼠脑组织及肺脏内病毒基因和细胞因子的表达情况,并制作肺脏组织切片观察其病理变化.[结果]MyD88+/+和MyD88-/-小鼠脑内感染弱毒株rRC-HL后出现轻微的临床症状,而标准强毒株CVS-24对MyD88+/+和MyD88-/-小鼠均具有致死性.与MyD88+/+小鼠相比,MyD88-/-小鼠的发病时间和死亡时间均延迟1～2 d,弱毒株rRC-HL脑内感染2种小鼠均从第10d开始恢复体质量,且临床症状逐渐消失,但MyD88-/-小鼠较MyD88+/+小鼠恢复得更快.脑内感染RABV后,小鼠脑组织相关细胞因子(IFN-α、IFN-γ、IL-1β、MCP-1和TNF-α)的表达发生明显变化,而在肺脏中的表达差异倍数只有少部分超过2.00倍,且随感染时间的推移其变化呈现不规律性.濒死期小鼠肺脏组织切片观察发现,MyD88+/+小鼠肺脏组织切片的细胞核染着色深,肺泡壁稍微增厚,有轻微炎症变化,有巨噬细胞出现;MyD88-/-小鼠肺脏组织切片的细胞核着色浅,肺泡壁增厚不明显,炎症变化较轻,有少量巨噬细胞浸润.[结论]脑内感染后第7d是RABV在小鼠脑组织中复制能力最强的时段,且脑组织相关细胞因子的表达差异倍数随病程的推移发生明显变化;肺脏组织切片并未发现典型的特征性病理变化,但RABV感染对MyD88-/-小鼠肺脏病理的影响小于MyD88+/+小鼠,即MyD88基因缺失有利于小鼠对抗RABV感染,抑制炎症产生及延迟机体发病.

    狂犬病病毒(RABV)小鼠MyD88基因敲除肺脏病理变化

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    猪SBP1基因过表达与干扰重组慢病毒载体的构建及鉴定

    胡荣斌洪兴潘志洪吴兴凤...
    2146-2154页
    查看更多>>摘要：[目的]构建硒结合蛋白1基因(SBP1)过表达与干扰重组慢病毒载体,并通过感染猪骨骼肌卫星细胞验证SBP1基因的过表达和沉默效果,为后续揭示SBP1基因调控肌纤维类型转化及猪肉品质的分子机理打下基础.[方法]在对猪SBP1蛋白进行生物信息学分析的基础上,根据GenBank中猪SBP1基因mRNA序列(XM_021089863.1)PCR扩增SBP1基因全长序列,克隆至过表达慢病毒载体pHBLV-CMV上构建SBP1基因过表达重组慢病毒载体;同时针对猪SBP1基因设计3个干扰靶点序列和1个阴性对照序列,分别克隆至干扰慢病毒载体pHBLV-U6上构建SBP1基因干扰重组慢病毒载体.以构建的重组慢病毒载体感染猪骨骼肌卫星细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定表达细胞系,并采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测SBP1基因及其蛋白的表达情况.[结果]猪SBP1蛋白分子式为C2523H3916N678O727S24,相对分子量为56.14839 kD,理论等电点(pI)为6.40,为稳定的分泌蛋白;存在39个潜在磷酸化位点,包括20个丝氨酸磷酸化位点、6个酪氨酸磷酸化位点及13个苏氨酸磷酸化位点.以构建的SBP1基因过表达与干扰重组慢病毒载体分别感染猪骨骼肌卫星细胞,经嘌呤霉素筛选2代后,在荧光显微镜下均能观察到绿色荧光.实时荧光定量PCR检测结果表明,过表达组的SBP1基因相对表达量极显著上调32.0倍(P<0.01,下同),干扰组中以shRNA-3的沉默效果达极显著水平,对应的SBP1基因相对表达量下调58.45%;Western blotting检测结果显示,过表达组的SBP1蛋白表达量极显著上调,而shRNA-1、shRNA-2和shRNA-3干扰组的SBP1蛋白表达量均极显著下调.[结论]基于猪骨骼肌卫星细胞成功构建了猪SBP1基因过表达稳定表达细胞系,同时鉴定出shRNA-3对SBP1基因的沉默效果最佳并获得稳定沉默细胞系,为后续揭示SBP1基因调控猪肉品质的分子机理打下了基础.

    猪SBP1基因骨骼肌卫星细胞过表达干扰重组慢病毒载体

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    2个杂交鸡种生长性能比较与生长曲线模型建立

    康佳佳何洋施红梅李子健...
    2155-2163页
    查看更多>>摘要：[目的]利用茶花鸡2号E系公鸡、腾冲雪鸡白肉公鸡分别与狄高D系母鸡杂交得到Y系和N系鸡,评定2种杂交后代生长性能,为探究最具优势的杂交后代生长发育规律提供理论参考.[方法]以同日出雏的Y系鸡和N系鸡作为研究对象,测定0～29周龄体重指标,记录生长发育情况;并在60、90和120日龄,随机挑选Y系和N系公鸡和母鸡各30只,测定体尺指标,比较2种鸡的差异及相关性,确定最具优势的杂交后代;利用Logistic、Gompertz和von Bertalanffy等3种非线性生长模型对其不同性别下的体重进行曲线拟合,求得最佳生长曲线模型.[结果]0～29周龄体重生长曲线中,Y系的公鸡体重明显优于N系,Y系的母鸡体重略优于N系.体重和体尺指标测定结果显示,Y系鸡和N系鸡均为公鸡极显著大于母鸡(P<0.01),且同一性别下Y系鸡明显优于N系鸡.用具杂交优势的Y系鸡作生长曲线拟合分析,von Bertalanffy模型拟合值更接近实测值,是Y系鸡最佳生长曲线模型.体重与体尺指标相关分析显示,Y系鸡的体重与胫围间具有较高相关性,因此,可将胫围作为Y系鸡选育的参考标准.[结论]Y系鸡即茶花鸡2号E系公鸡与狄高D系母鸡的杂交改良效果优于N系鸡即腾冲雪鸡白肉公鸡与狄高D系母鸡的杂交改良效果,且von Bertalanffy生长曲线拟合模型能更准确地模拟Y系鸡生长发育规律,确定为最佳生长曲线模型.

    茶花鸡2号E系腾冲雪鸡白肉狄高D系生长性能生长曲线杂交改良

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    碱度胁迫对青海湖裸鲤血清生理生化指标的影响

    阿琳林张海琛许保可岳苗...
    2164-2174页
    查看更多>>摘要：[目的]探究碱度对青海湖裸鲤(Gymnocypris przewalskii)相关生理生化指标的影响,对制定青海湖裸鲤应对碱环境的策略提供理论参考.[方法]以青海湖裸鲤血清为研究对象,进行慢性碱度胁迫,碱度先逐渐上升至最高点后逐渐降低(未胁迫为对照),测定分析取各胁迫点血清中激素、渗透、能量、氧化及免疫等指标的变化.[结果]青海湖裸鲤血清的皮质醇(COR)、钙(Ca2+)、血糖(GLU)、渗透压(OS)、Na+/K+-ATPase(NKA)、碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)、碳酸酐酶Ⅳ(CAⅣ)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和丙二醛(MDA)变化趋势相同,均为随碱度升高先升高后下降,随碱度降低则先下降后升高.COR与CAIV、总胆固醇(TC)、ALT、GPX和MDA呈极显著正相关(P<0.01),与TP、GLOB、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、TG和CAT呈显著正相关(P<0.05,下同).胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、超氧化物歧化酶(SOD)、钠(Na+)、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)有相同变化趋势,无论碱度升高还是下降,均呈先下降后升高变化趋势.三碘甲状腺原氨酸(T3)、TC、HDL-C和LDL-C与碱度呈负相关,肌酐(CREA)和总胆红素(TBIL)与碱度呈正相关.IGF-Ⅰ与T3呈显著正相关.甲状腺激素(T4)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活力随碱度升高先升高后下降再恢复,之后随碱度降低先下降后升高.生长激素(GH)和氯(Cl-)随碱度升高先升高后下降再升高,之后随碱度降低逐渐升高.催乳素(PRL)含量随碱度升高先稍微下降后恢复再降低,之后随碱度降低先迅速升高后恢复.钾(K+)浓度随碱度升高而下降,随碱度降低先升高后下降.尿酸(UA)含量随碱度升高先下降后恢复,随碱度降低逐渐下降.尿素(UREA)含量随碱度升高先升高后恢复再升高,随碱度降低继续升高后恢复.[结论]在碱度胁迫时,青海湖裸鲤COR起主导作用,T3和IGF-Ⅰ协同,T4调控GH辅助,从而维持鱼类的体液稳态;TP、ALB、GLOB和TG含量的升高、SOD活力先下降后恢复及AKP活力先下降后恢复再升高等反应可能是青海湖裸鲤应对碱环境的一个重要策略.

    青海湖裸鲤碱度胁迫渗透指标能量代谢指标抗氧化指标免疫指标

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    猪塞内卡谷病毒VP1蛋白原核表达及多克隆抗体制备

    莫红芳石宗承陆晶山何东贤...
    2175-2183页
    查看更多>>摘要：[目的]原核表达猪塞内卡谷病毒(Seneca valley virus,SVV)VP1蛋白,制备SVV-CH-HB2016 VP1蛋白多克隆抗体并分析其抗原性,为进一步研发SVV病毒诊断试剂盒和亚单位疫苗提供参考依据.[方法]对SVV-CH-HB2016 VP1基因序列进行密码子优化,构建质粒pUCK/VP1-opt,双酶切后连接至pET-28a(+)载体,构建原核表达质粒pET-28a-VP1.将重组质粒pET-28a-VP1转化大肠杆菌BL21(DE3)分子伴侣感受态细胞,经IPTG诱导表达获得重组VP1蛋白.采用Western blotting方法分析VP1蛋白的反应原性,并以包涵体变性和复性方式纯化.随后将VP1蛋白免疫新西兰白兔,分离血清获得重组VP1蛋白的多克隆抗体.以间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定抗体的效价水平,以Protein A+G Agarose抗体纯化试剂盒纯化多克隆抗体.通过Western blotting和间接免疫荧光抗体试验(IFA)法验证多克隆抗体与SVV-CH-HB2016毒株反应的特异性.[结果]成功构建原核表达质粒pET-28a-VP1,在IPTG终浓度为0.1 mmol/L、37℃诱导4h条件下,重组VP1蛋白成功表达并主要以包涵体形式存在;Western blotting分析结果显示,重组VP1蛋白可与His-Tag Mouse mAb发生特异性结合,具有良好的反应原性;经变性和复性纯化的重组包涵体蛋白纯度和浓度均较高;采用间接ELISA法检测多克隆抗体的效价为1∶32000;纯化后的抗体无明显杂带,纯度大于90.0%;Western blotting和IFA鉴定结果表明,多克隆抗体可特异性识别SVV-CH-HB2016毒株,重组VP1蛋白具有较好的免疫原性.[结论]通过原核表达SVV VP1蛋白获得的重组VP1蛋白具有较好的抗原性,制备的多克隆抗体特异性良好,可作为诊断试剂盒及亚单位疫苗研制的候选抗原.

    猪塞内卡谷病毒VP1蛋白原核表达多克隆抗体

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    鲤致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及生物学特性分析

    裴立硕刘彬韩卓然孙敬锋...
    2184-2194页
    查看更多>>摘要：[目的]分离鉴定鲤(Cyprinus carpio)致病性维氏气单胞菌(Aeromonas veronii),为探究暴发病害养殖鲤的死亡原因及为防治水产经济鱼类病害提供参考依据.[方法]从暴发病害鲤的内脏组织中分离病原菌,通过形态观察、生理生化鉴定、16S rDNA和gyrB基因测序分析确定其分类地位,通过人工回归感染试验判断其致病性,通过药物敏感性试验判定其对抗生素的耐药性.[结果]细菌形态学观察和生理生化试验结果表明,从暴发病害鲤的内脏中分离的病原菌LY623为维氏气单胞菌.16S rDNA和gyrB基因测序结果显示,LY623菌株与维氏气单胞菌菌株的相似性最高,且在系统发育进化树中与维氏气单胞菌聚为一支.毒力基因和耐药基因检测结果表明,菌株LY623携带Alt、Act、hlyA、lip和ela 5种毒力基因及tem、ctxM、tetC、qnrA和qnrS 5种耐药基因.药敏试验结果表明,LY623菌株对四环素、诺氟沙星和红霉素等14种抗菌药物具有耐药性,对庆大霉素、氟苯尼考和氯霉素等14种抗菌药物高度敏感.人工回归感染试验结果表明,分离获得的维氏气单胞菌LY623对鲤的半数致死量(LD50)为2.64×103 CFU/g,对斑马鱼(Danio rerio)的LD50为4.77×107 CFU/g.[结论]从暴发病害鲤内脏组织中分离到的病原菌LY623鉴定为维氏气单胞菌,其毒力基因包括Alt、Act、hlyA、lip和ela,耐药基因包括tem、ctxM、tetC、qnrA和qnrS.该菌株对鲤具有较高毒力,在其肠道、鳃、肝脏和脾脏中引起明显的组织病理学变化;在鲤实际养殖过程中可选用庆大霉素、氟苯尼考和氯霉素等对该菌感染引起的疾病进行治疗.

    鲤维氏气单胞菌形态观察16SrDNAgyrB基因药敏试验

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