查看更多>>摘要:目的:探究成纤维细胞生长因子13(fibroblast growth factor 13,FGF13)在下牙槽神经损伤修复中的作用及机制.方法:建立SD(Sprague-Dawley)大鼠下牙槽神经损伤模型,在损伤后1、3、7 d时收取下牙槽神经组织样本RNA,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测损伤后不同时间FGF13基因的表达水平;提取新生SD大鼠的原代三叉神经细胞,并将其分为实验组和对照组,分别转染FGF13 过表达质粒和对照质粒,转染成功后 3 d提取细胞RNA,利用RT-qPCR检测神经营养因子的基因表达水平,并对三叉神经细胞进行Neun和βⅢ-Tubulin免疫荧光染色,使用激光扫描共聚焦显微镜摄片,观测神经细胞的轴突长度;将ND7/23 神经细胞分为过表达组(ND7/23-FGF13)和对照组(ND7/23-vector),分别转染FGF13过表达慢病毒和对照病毒,嘌呤霉素筛出稳转株,进行FGF13 蛋白免疫荧光染色和JC-1 线粒体膜电位荧光探针染色,提取细胞RNA,利用RT-qPCR检测线粒体自噬相关基因的表达.结果:下牙槽神经损伤后1 d,该组织的FGF13表达量显著升高,损伤后3 d表达量降低,损伤后7 d表达量降至对照组水平;实验组与对照组相比,其FGF13、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)等表达量升高,实验组细胞轴突长度大于对照组;慢病毒过表达组与对照组相比,FGF13蛋白在细胞核中分布更密集,线粒体膜电位明显升高,线粒体自噬相关基因表达量升高.结论:下牙槽神经损伤后,FGF13 表达量出现一过性升高,其对下牙槽神经的修复过程可能具有潜在意义;在三叉神经细胞中过表达FGF13可以促进神经细胞的轴突伸长,其内在机制可能与调节线粒体功能、促进线粒体稳态有关.