期刊,南京农业大学学报 2021年卷1期_国家学术搜索

期刊信息/Journal information

南京农业大学学报

南京农业大学

主办单位：南京农业大学

主　　编：郑小波

出版周期：双月刊

国际刊号：1000-2030

电子邮箱：nauxb@njau.edu.cn

电　　话：025-84395214

邮政编码：210095

地　　址：南京市卫岗1号

南京农业大学学报/Journal Journal of Nanjing Agricultural UniversityCSCD北大核心CSTPCD

查看更多>>本学报是综合性、多科性农业科学学术期刊，中国自然科学核心期刊。主要刊登动物遗传育种、生理生化，作物栽培、病虫害防治，园艺科学，食品科学，动物医学与动物科学，资源与环境科学，农业应用化学，农业经济与贸易，土地管理及农业工程等学科的学术论文、研究报告、科研简报和文献综述。

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收录年代

氯虫苯甲酰胺对亚洲玉米螟解毒酶活性及生长发育的影响

支昊宇丁新华陈萍叶茂林...

89-96页

查看更多>>摘要：[目的]本文旨在明确新疆亚洲玉米螟田间种群对氯虫苯甲酰胺的敏感性及该药剂对玉米螟3种解毒酶活性及生长发育的影响.[方法]采用点滴法测定新疆乌鲁木齐、伊宁、疏勒和泽普4个田间种群对氯虫苯甲酰胺的敏感性,利用氯虫苯甲酰胺LD20和LD50处理玉米螟3龄幼虫72 h以及LD50连续筛选9代,然后测定不同处理及不同田间种群的解毒酶活性并观察处理后的玉米螟生长发育状况.[结果]与乌鲁木齐种群相比,疏勒和泽普种群对氯虫苯甲酰胺的敏感性降低(抗性倍数分别为4.0和4.2倍).伊宁种群的细胞色素P450酶和疏勒种群的以DCNB为底物的谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性最高;氯虫苯甲酰胺LD20和LD50处理玉米螟72 h可导致其GST(DCNB为底物)活性显著升高,分别是对照的1.46和1.86倍;连续用氯虫苯甲酰胺LD50筛选的玉米螟F5和F8代的P450酶活性是敏感品系的4.27和5.09倍,F5和F8代的GST(底物CNDB)活性以及F8代GST(底物DCNB)活性是敏感品系的1.27、1.33和1.36倍.LD20处理72 h可使当代种群蛹重和单雌产卵量显著降低,连续用氯虫苯甲酰胺LD50处理玉米螟9代可导致F10代幼虫期延长,蛹重和成虫羽化率增加,而单雌产卵量及孵化率比对照降低14.83％和5.84％,最终选育品系的内禀增长率显著低于敏感品系.[结论]新疆地区玉米螟对氯虫苯甲酰胺抗性产生的风险较高,氯虫苯甲酰胺对P450和GST有诱导作用,这2种代谢酶可能参与玉米螟对氯虫苯甲酰胺抗性的形成.

关键词：

亚洲玉米螟氯虫苯甲酰胺解毒酶生长和发育亚致死效应

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可视化细胞色素b5蛋白的显色核心片段解析

展恩玲盛成旺陈煜明唐涛...

97-102页

查看更多>>摘要：[目的]本文旨在明确含Cyt-b5类血红素/类固醇结合结构域(Cyt-b5 D)显色片段的最佳长度及其与原核表达载体的普适性,并筛出有效的可视化标签,以期提高载体构建的效率和便捷性.[方法]分析二化螟Cyt-b5蛋白结构域,将其划分成含Cyt-b5 D的不同长度片段(OA、OB、OC等),并分别与3种原核表达载体pET-28a(+)、pET-41a(+)和pET-30a(+)进行连接和异源表达;将筛选的显色片段与二化螟RDL1基因融合表达,比较不同表达时间菌液的显色反应和吸光值;用亲和层析法纯化显色片段表达以及与RDL1表达的融合蛋白,然后进行Western blot检测.[结果]OA片段是最佳的显色片段,在3种原核表达载体中均可表达出红色的蛋白,且与RDL1融合表达时显色稳定,表明其具有普适性.在420 nm波长下的特征吸收峰可用于实时监测显色菌液的生长状态,而层析柱中的红色变化可用于判断蛋白纯化过程.此外,利用Western blot可检测到目的蛋白,表明显色片段的存在并未干扰目的蛋白的准确鉴定.[结论]Cyt-b5显色片段(OA)可作为原核表达系统的可视化标签,为蛋白表达和纯化等试验操作提供指示标记,从而提高其操作的便捷性和时效性.

关键词：

细胞色素b5载体构建原核表达Westernblot可视化标签

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茄子SmNTF3基因的克隆及其表达模式分析

李婷朱文姣陈敏杨清...

103-110页

查看更多>>摘要：[目的]本文旨在克隆茄子(Solanum melongena L.)促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因SmNTF3,阐明其在盐和干旱胁迫处理下的表达特性.[方法]以茄子'苏崎1号'为试验材料,克隆SmNTF3的全长序列,对其基因结构和序列同源性进行分析,通过烟草叶片瞬时表达系统进行SmNTF3蛋白的亚细胞定位,采用实时荧光定量PCR检测SmNTF3基因在不同组织及盐和干旱胁迫下的表达情况.[结果]SmNTF3基因开放阅读框长度为1119 bp,编码1个含372个氨基酸残基的蛋白.生物信息学分析表明,该蛋白具有保守的S_TKc结构域,富含α-螺旋和无规则卷曲.系统发育分析表明,SmNTF3属于MAPK家族C组成员,其氨基酸序列具有高度保守性,与番茄和马铃薯亲缘关系最近.亚细胞定位发现,SmNTF3蛋白在烟草叶片的细胞核和细胞质膜上表达.SmNTF3基因具有组织特异性,在茎中表达量最高.盐和干旱胁迫能够显著诱导SmNTF3基因的上调表达.[结论]从茄子中克隆了1个MAPK家族C组成员SmNTF3,该基因受盐和干旱胁迫诱导表达,可能参与茄子对盐和干旱胁迫的响应过程.

关键词：

茄子SmNTF3基因克隆亚细胞定位表达分析

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贵州木霉NJAU4742几丁质酶基因chi8的克隆、表达和酶学特性研究

王小松马磊刘志颖李托...

111-118页

查看更多>>摘要：[目的]本研究旨在从贵州木霉(Trichoderma guizhouense NJAU4742)菌株中克隆、表达几丁质酶基因chi8并深入研究其酶学特性,分析Chi8水解胶体几丁质的产物,为其在农业生产中的实际应用提供理论依据.[方法]基于序列比对获取chi8与其他几丁质酶基因的同源关系,并设计引物扩增得到完整的chi8序列,利用pET-29a质粒和大肠杆菌BL21进行异源表达;经镍柱纯化后并研究Chi8酶学特性;利用MALDI-TOF/MS检测Chi8水解胶体几丁质的最终产物;基于同源建模法构建Chi8的三维模型并与几丁六糖进行对接获取其催化相关位点信息.[结果]本试验克隆、表达得到的Chi8与哈茨木霉几丁质酶(ACM47359)的序列相似度为93.38％;Chi8在30～40℃酶活性较高且能保持较好的热稳定性,在pH6.0时酶活性为0.50 U·μmol-1·h-1;Ca2+可以显著提高Chi8的酶活性,可达到原酶活性的110.62％,而Co2+、Cu2+、Fe3+均有抑制作用,与酶作用后Chi8酶活性下降至原酶活性的89.70％、60.17％和5.93％;在酸性条件下,Chi8水解胶体几丁质的最终产物主要为几丁二糖[(GlcNAc)2].Chi8同源建模结果表明,其含有18个螺旋和15个β-折叠,末端的IMD残基可形成1个咪唑环;底物对接结果表明,Chi8中Asn197、Trp110、Tyr218、Arg274、Arg31可以与几丁六糖形成氢键,可能为该蛋白的活性中心.[结论]本试验克隆、表达得到的几丁质酶Chi8具有良好的生化特性,能够高效水解胶体几丁质并生成壳寡糖,产物主要为几丁二糖.

关键词：

贵州木霉几丁质酶异源表达酶学特性壳寡糖蛋白同源建模

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解淀粉芽胞杆菌SQR9亲缘识别与辨别相关基因的筛选

严无瑕仇美华刘妍薛妍生...

119-126页

查看更多>>摘要：[目的]依据不同基因突变体的群集运动表型研究解淀粉芽胞杆菌SQR9中参与亲缘识别和辨别过程的关键基因.[方法]利用带有mariner转座元件的穿梭质粒pMarA,构建菌株SQR9的突变体文库,同时结合实验室已保存突变体,通过Swarming平板对峙表型进行筛选,找到与菌株SQR9和FZB42表型发生变化的突变株.针对Swarming表型变化转座子突变株,利用反筛标记pheS进行基因无痕敲除验证与表型验证.[结果]敲除菌株SQR9的sinR、fliD、flhO和degU基因后影响其亲缘识别野生型亲本菌株的能力.定点敲除菌株SQR9的flhO基因后发现,Swarming表型与Tn转座插入突变体一致,都与野生型菌株SQR9形成边界表型,可能参与亲缘识别过程.敲除spo0A调控基因显著影响菌株SQR9的功能,其与解淀粉芽胞杆菌FZB42的对峙边界表型消失,可能参与非亲缘排斥.[结论]解淀粉芽胞杆菌SQR9中全局性调控基因(spo0A、sinR和degU)、鞭毛蛋白合成相关基因(fliD和flhO)、芽孢萌发基因(gerAA和gerAB)、抗生素合成基因(srfAA)及其他基因(patB和yugK)可能参与菌株SQR9的亲缘识别与辨别系统.

关键词：

解淀粉芽胞杆菌亲缘识别亲缘辨别基因敲除

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有机肥替代化肥对不同生产模式茶园茶叶生产的影响

张峻伟王志文季凌飞郭俊杰...

127-135页

查看更多>>摘要：[目的]本研究针对不同生产模式茶园,探究并建立具备地区特色的有机肥替代化肥技术模式,为茶园化肥减施提供理论依据.[方法]于2017年10月在江苏句容、江苏溧阳、福建福安、四川蒲江、云南大渡岗5个不同生产模式典型茶园设置不同有机肥替代化肥田间试验,包括不施肥对照(CK)、常规施肥处理(CF)、生物有机肥替代处理(T1)、商品有机肥替代配施木醋液+氨基酸类叶面肥处理(T2)和商品有机肥替代配施氨基酸类叶面肥处理(T3),分析不同处理对茶青产量、化学氮肥利用率、茶叶品质及经济效益的影响.[结果]生物有机肥替代、商品有机肥替代配施木醋液+氨基酸类叶面肥及商品有机肥替代配施氨基酸类叶面肥可以在保证产量和品质的基础上减少36％的氮素化肥投入,但不同生产模式茶园的最佳有机肥替代化肥处理略有差异.在以制作名优绿茶为主的句容试验茶园进行商品有机肥替代并配施氨基酸类叶面肥效果最佳,平均产量可达140 kg·hm-2,增产13％,氮肥偏生产力提高73％,经济效益提高5％;在叶色白化突变品种的溧阳试验茶园进行生物有机肥替代效果最佳,平均产量可达501 kg·hm-2,增产9％;在以机采为主的福安和大渡岗的试验茶园进行商品有机肥替代并配施木醋液+氨基酸类叶面肥效果最优,平均产量分别可达6326和10294 kg·hm-2,分别显著增产24％和12％,并使氮肥偏生产力分别提高96％和68％,经济效益分别提高23％和3％;在以手工采摘与机采相结合的蒲江试验茶园施加有机肥能够在减施化肥的前提下保持和单施化肥相同的产量.[结论]在以制作绿茶为主的茶园进行有机肥替代并配施氨基酸类叶面肥可显著提高产量,其经济效益最高可提升23％,且在机采茶园进行有机肥替代并配施木醋液+氨基酸类叶面肥要优于仅配施氨基酸类叶面肥.在叶片白化突变品种茶园,推荐施加生物有机肥.

关键词：

茶树化肥有机肥经济效益产量

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刚地弓形虫热休克蛋白21体外条件下对小鼠巨噬细胞功能的影响

李纯静周天缘于正青储稳...

136-143页

查看更多>>摘要：[目的]本试验旨在探究刚地弓形虫热休克蛋白21(TgHSP21)在体外对小鼠巨噬细胞系(Ana-1)功能的调节作用.[方法]构建重组表达载体pET-32a/TgHSP21,获得重组蛋白TgHSP21(rTgHSP21).用免疫荧光抗体试验(IFA)验证rTgHSP21在体外与Ana-1细胞的结合情况.Ana-1细胞分别用不同质量浓度(5、10、20、40、80μg·mL-1)的rTgHSP21处理后,采取细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况,应用Transwell细胞小室检测细胞趋化情况,应用流式细胞术检测Ana-1细胞凋亡和吞噬能力.分别用总一氧化氮(NO)试剂盒和细胞因子ELISA试剂盒检测Ana-1细胞的NO和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素12(IL-12)、IL-6、IL-1β的分泌量.[结果]成功获得纯化的rTgHSP21,其具有与Ana-1细胞结合的能力.5和10μg·mL-1的rTgHSP21均显著促进Ana-1细胞的增殖,各个浓度的rTgHSP21均显著促进细胞凋亡和吞噬能力.80μg·mL-1 rTgHSP21明显促进Ana-1细胞分泌NO.在不同浓度rTgHSP21作用下,细胞因子IL-6和TNF-α的表达量均明显上升,而其质量浓度为10、20、40和80μg·mL-1时IL-12的分泌被抑制.此外,rTgHSP21显著抑制了Ana-1细胞的迁移能力.[结论]TgHSP21能够与Ana-1细胞结合并在体外条件下调节Ana-1细胞的增殖、吞噬、凋亡、迁移及分泌.

关键词：

弓形虫热休克蛋白21小鼠巨噬细胞系免疫功能

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复合益生菌对肉仔鸡小肠形态和盲肠微生物菌群的影响

梅文晴冯宇妍姚志浩倪迎冬...

144-150页

查看更多>>摘要：[目的]本试验旨在研究早期饲喂复合益生菌对肉仔鸡盲肠微生物组成、小肠上皮组织结构及紧密连接相关基因表达的影响.[方法]将144只1日龄健康青脚麻鸡随机分为3组,分别为对照组(CON)、低剂量(50 mg·d-1)益生菌组(LP)和高剂量(100 mg·d-1)益生菌组(HP),每组6个重复,每个重复8只鸡,从1日龄开始饮水中添加益生菌,试验期为2周.试验期间记录采食量和体重,于第14日龄采集小肠上皮组织,检测其形态结构及紧密连接相关基因表达,16S rRNA测序分析盲肠内容物微生物组成.[结果]试验期间HP组肉鸡体重高于对照组,但差异不显著(P>0.05).与对照组相比,HP组肉鸡1～7日龄平均日采食量显著降低(P<0.05),但7～14日龄平均日采食量有升高的趋势(P>0.05);HP组肉鸡1～7日龄料重比极显著低于CON组(P<0.01).LP组与CON组之间以上指标均无显著差异(P>0.05).与CON组相比,添加益生菌显著降低隐窝深度,增加绒毛高度及绒毛高度与隐窝深度的比值;HP组回肠和盲肠上皮闭锁小带蛋白1基因(ZO1)和回肠上皮闭合蛋白基因(OCLN)表达显著上调(P<0.05);LP组盲肠上皮黏蛋白2基因(MUC2)表达显著上调(P<0.05).16S rRNA高通量测序结果表明,与CON组相比,早期饲喂复合益生菌对肉鸡盲肠内容物中细菌多样性无显著影响(P>0.05),但LP组盲肠中Sellimonas和Intestinimonas属的丰度显著增加(P<0.05),HP组Akkermansiaceae科的丰度极显著增加(P<0.01).[结论]早期饲喂复合益生菌对肉仔鸡盲肠内容物中细菌多样性无显著影响,但可升高某些有益菌的定殖丰度;上调小肠上皮组织中紧密连接相关基因的表达,促进绒毛生长,从而潜在影响肉鸡早期和后期的生长性能.

关键词：

复合益生菌小肠上皮结构紧密连接蛋白盲肠微生物区系肉仔鸡

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早期乳铁蛋白干预对哺乳仔猪盲肠菌群结构、短链脂肪酸含量及黏膜炎症因子水平的影响

赵方舟胡平汪晶朱伟云...

151-159页

查看更多>>摘要：[目的]本文旨在探讨早期乳铁蛋白干预对哺乳仔猪的盲肠菌群结构、盲肠中短链脂肪酸含量和盲肠黏膜中炎症因子水平的影响,以进一步了解早期乳铁蛋白干预对仔猪肠道产生影响的途径.[方法]试验选取6窝(每窝10头)体重相近(约1.51 kg)的新生仔猪,采用窝内分组法将每窝仔猪均分为对照组和乳铁蛋白组.在仔猪出生后1～7 d,每天对2组仔猪进行3次灌喂,其中乳铁蛋白组仔猪每次灌喂8～12 mL的乳铁蛋白溶液,使每天乳铁蛋白的有效灌喂量达到0.5 g·kg-1,对照组仔猪灌喂相同剂量的生理盐水.试验主要检测盲肠内容物中菌群门水平和属水平的变化情况、短链脂肪酸水平以及盲肠黏膜的细胞因子水平.[结果]与对照组相比,早期乳铁蛋白干预提高了盲肠菌群的丰富度指数ACE和Chao 1;在试验8d时,乳铁蛋白提高了哺乳仔猪盲肠菌群中拟杆菌门的相对丰度并降低变形菌门的相对丰度,提高拟杆菌、瘤胃球菌、丁酸弧菌等菌属的相对丰度,降低大肠杆菌、巴氏杆菌和韦荣球菌等菌属的相对丰度;在试验21 d时,乳铁蛋白降低梭杆菌门的相对丰度,提高乳杆菌、罗斯氏菌和瘤胃球菌等菌属的相对丰度,降低梭杆菌属的相对丰度.同时乳铁蛋白增加盲肠内容物中乙酸、丙酸、丁酸和总短链脂肪酸的含量,提升盲肠黏膜白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)水平,降低白细胞介素8(IL-8)水平.[结论]早期乳铁蛋白干预可以改善盲肠菌群结构,提高盲肠内容物中短链脂肪酸的含量并调节盲肠黏膜的免疫反应,有利于哺乳仔猪的后期生长发育.

关键词：

乳铁蛋白哺乳仔猪盲肠菌群结构短链脂肪酸炎症因子

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毛喉素诱导猪卵泡颗粒细胞体外分化机制的研究

于昊李曼曼薛洋姜志洋...

160-168页

查看更多>>摘要：[目的]本试验旨在研究毛喉素(FSK)对体外培养的猪卵泡颗粒细胞分化的作用及机制.[方法]体外分离培养猪原代卵泡颗粒细胞,预培养24 h.用10 nmol·L-1 FSK处理细胞48 h,检测细胞形态、脂滴积聚、标记基因和周期相关基因表达状况;处理96 h后检测孕酮(P4)水平及类固醇合成相关蛋白的表达水平.[结果]与对照组相比,FSK改变了细胞形态,使细胞直径增大,细胞内脂滴含量增加(P<0.01);FSK降低细胞的增殖活性和增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达水平(P<0.01);FSK降低颗粒细胞标记基因促卵泡素受体(FSHR)基因表达水平,提高黄体细胞标记基因前列腺素受体(PTGFR)和促黄体素受体(LHCGR)基因表达水平(P<0.01);FSK促进P4分泌,提高了类固醇合成相关蛋白StAR、P450scc和3β-HSD的表达水平(P<0.01);从细胞周期看,FSK降低了细胞周期素B1(CCNB1)、细胞周期素D1(CCND1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)基因表达水平(P<0.01),而使细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A/B(P21cip1/P27kip1)基因表达水平上调(P<0.01),并将细胞周期阻滞在G0/G1期.[结论]FSK能够通过抑制细胞增殖、增强脂滴积聚和孕酮合成代谢以及退出细胞周期来促进颗粒细胞向黄体细胞转化.

关键词：

毛喉素猪卵泡颗粒细胞分化细胞周期

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