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期刊信息/Journal information
微生物学免疫学进展
微生物学免疫学进展

朱莉萍

双月刊

1005-5673

bjb5866@sina.com

0931-8316208

730046

甘肃省兰州市盐场路888号

微生物学免疫学进展/Journal Progress in Microbiology and ImmunologyCSTPCD
查看更多>>本刊办刊宗旨为推动医学科技进步，交流经验，培养人才，为卫生防疫、临床医学、生物制品研制提供最新科技信息。
正式出版
收录年代

    中国人用狂犬病疫苗百年发展

    石磊泰俞永新
    1-8页
    查看更多>>摘要：自1885年法国人巴斯德发明狂犬病疫苗之后约30年,人用狂犬病疫苗才被引入中国.从20世纪20年代开始,中国人用狂犬病疫苗历经动物脑组织疫苗、佐剂地鼠肾细胞疫苗、浓缩佐剂地鼠肾细胞疫苗、浓缩纯化佐剂地鼠肾细胞疫苗、浓缩纯化无佐剂地鼠肾细胞疫苗、Vero细胞疫苗和人二倍体细胞疫苗等发展历程,生产工艺才逐步成熟、稳定.从百年前年产量20～50人份到2022年年产量2 000万人份,中国已跃升为人用狂犬病疫苗的生产和使用大国.经过近百年的努力,中国人群狂犬病的发病率降到0.011 1/10万,人用狂犬病疫苗的接种功不可没.人用狂犬病疫苗在中国的百年发展史,也是中国生物制品百年发展的缩影.

    狂犬病巴斯德人用狂犬病疫苗百年发展史

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    脐带间充质干细胞对新生小鼠坏死性小肠结肠炎的保护作用

    杨柯王薇赵强蔺莉...
    9-16页
    查看更多>>摘要：目的 探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)对坏死性小肠结肠炎(necro-tizing enterocolitis,NEC)小鼠模型肠组织的保护作用及可能的分子机制.方法 选取新生C57BL/6小鼠,采用高渗配方喂食、缺氧和冷刺激的方法,构建NEC小鼠模型,随机分为对照(母乳喂养)组、坏死性小肠结肠炎(NEC+PBS)组和间充质干细胞治疗(NEC+MSC)组,每组10只.UC-MSCs干预后,进行肠道宏观评估及HE染色观察肠组织病理形态学变化,免疫荧光染色检测上皮细胞增殖标志物KI-67和中性粒细胞浸润标记物髓过氧化物酶(myeloperox-idase,MPO)的表达;实时荧光定量PCR检测肠干细胞标记物富含亮氨酸的G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5)、炎症指标白介素 6(interleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)的mRNA表达.结果 UC-MSCs经腹腔注射给药后,NEC发生率由50％降低为20％(P＜0.05);肠道损伤、小肠宏观学评分、组织病理学评分均低于NEC+PBS组,差异均有统计学意义(P=0.048 0和0.024 3,P均＜0.05);肠道上皮细胞增殖标记物KI-67阳性细胞数量及肠道干细胞标记物Lgr5基因表达量较NEC+PBS组均增加,差异均有统计学意义(P=0.012 9、0.030 4,P均＜0.05);肠道中性粒细胞浸润指标MPO、炎症指标IL-6和TNF-α较NEC+PBS组均降低,差异均有统计学意义(P=0.020 1、0.000 5和0.001 5,P均＜0.05).结论 UC-MSCs可通过增加肠道上皮细胞增殖、恢复肠道干细胞活性和减少炎症因子来减轻NEC小鼠肠道损伤,具有较好的保护作用.

    脐带间充质干细胞坏死性小肠结肠炎肠道保护作用

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    重组猪胰酶在冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)中的应用

    肖蕾刘晓巍张志刚马树奇...
    17-22页
    查看更多>>摘要：目的 探究重组猪胰酶(recombinant porcine trypsin,RPT)代替猪源胰酶在冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产中的可能性.方法 选用SPF级地鼠,无菌取肾,用4种不同浓度(0.05、0.10、0.15和0.20 mg/mL)的重组猪胰酶消化原代地鼠肾(primary hamster kidney,PHK)细胞,比较细胞总数、细胞活率以及培养6 d的细胞形态,筛选出最佳重组猪胰酶的工作浓度;对消化液A(含0.30％柠檬酸钠的0.30 mg/mL重组猪胰蛋白酶溶液)和消化液B(含0.30％柠檬酸钠的0.15 mg/mL重组猪胰蛋白酶溶液)消化效果进行对比,选择合适的消化液;对P1代PHK细胞接种狂犬病病毒aG株,确定最佳病毒感染复数(multiplicity of infection,MOI);对不同胰酶消化的细胞接种狂犬病病毒aG株,并比较两者病毒滴度.结果 重组猪胰酶对原代PHK细胞消化的最佳浓度为0.10 mg/mL,消化液A更适用于P1代PHK细胞的消化,细胞培养6 d后形成致密单层,胞体饱满;最佳MOI范围为0.10～0.50,且试验具有高度重复性;镜下观察细胞病变无明显变化,但是重组猪胰酶消化后的细胞比猪源胰酶脱落较少,肉眼可见病毒收获液更澄清;2种胰酶消化制备的P1代PHK细胞病毒滴度差异无统计学意义(P=0.630,P＞0.05).结论 重组猪胰酶可以替代猪源胰酶用于制备冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞),为冻干人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)生产工艺的改进奠定基础.

    重组猪胰酶原代地鼠肾细胞狂犬病病毒消化液疫苗制备

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    基于转录组测序的黄芩素对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的研究

    尧静杜娜李焕芹尹智平...
    23-30页
    查看更多>>摘要：目的 通过转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)初步探讨黄芩素对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(car-bapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的作用机制.方法 采用 VITEK MS 质谱检测仪和 Vitek2-Compact药敏分析对菌株T3进行鉴定和药敏试验.通过微量肉汤稀释法测定黄芩素(baicalein,BE)对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T3的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC).用Illumina NovaSeq 6000转录组测序平台对1/2 MIC黄芩素处理的肺炎克雷伯菌株T3和正常对照组进行RNA-Seq;利用Trimmomatic、Rockhoppe、edgeR和Goatools等生物信息学工具软件处理转录组数据,并分析得到的2组间差异表达基因、基因本体论(gene ontology,GO)注释、GO富集及KEGG代谢通路.结果 菌株T3为对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌,黄芩素对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T3的MIC为160 μg/mL.与对照组相比,黄芩素组有723个差异表达基因,其中上调基因为659个,下调基因为64个;这些差异基因GO注释主要涉及生物学过程14个功能亚类,细胞组分3个功能亚类,分子功能10个功能亚类;GO富集主要发生在生物调控、次级代谢等过程,KEGG代谢通路主要富集在膦酸盐和次膦酸盐、铁载体非核糖体肽生物合成、ABC转运蛋白等代谢通路.结论 黄芩素通过多途径抑制碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌T3生长,其中主要作用靶点是生物调控、次级代谢、膦酸盐和次膦酸盐代谢、铁载体非核糖体肽生物合成及ABC转运蛋白等途径,为进一步研究黄芩素抗CRKP提供依据.

    黄芩素碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌转录组测序差异表达基因

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    微生物学免疫学进展编辑部
    30页
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    人血清抗肺炎球菌荚膜多糖的血清特异性IgG抗体ELISA检测方法的适用性验证

    石刚杨田瑶任珍芸李阿妮...
    31-39页
    查看更多>>摘要：目的 验证ELISA中使用国产酶标板和国产细胞壁C多糖(cell wall polysaccharides,CWPS)替代现用的进口酶标板(Greiner 655080)和丹麦国家血清研究所(Statens Serum Institut,SSI)的CWPS,用于检测肺炎球菌疫苗免疫人血清中抗荚膜多糖IgG抗体的可行性和适用性.方法 执行PnPS ELISA,以现用SSI的CWPS和Greiner 655080酶标板为对照,分别用国产CWPS和国产酶标板(96BTA),检测相同样品中24个肺炎球菌血清型别的抗荚膜多糖IgG抗体,对检测结果进行系统分析.结果 ①国产酶标板的适用性验证结果:国产及进口酶标板检测质控血清09CS的24个血清型的荚膜多糖IgG抗体含量完全一致,林氏一致性相关系数(lin's concordance correlation coeffi-cient,rc)为0.990 3;20份实验室内质控血清的结果为高度一致,re为0.958 0;24个血清型的样本最低检测限(lower limit of detection,LLQ)在 0.008～0.072 µg/mL,进口酶标板为 0.010～0.079 μg/mL 之间.② CWPS 的适用性验证结果:国产CWPS的生化检测结果和1 H核磁共振波谱图(nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR)与现用SSI的CWPS基本一致;国产和进口 CWPS吸收后检测质控血清09CS的24个肺炎球菌血清型特异性荚膜多糖抗体值结果完全一致,rc为0.999 0;国产及进口 CWPS检测所选10对免前及免后血清的检测结果为高度一致,免前血清的rc为0.953 0,免后血清的rc为0.972 0.结论 经验证,国产CWPS可替代进口 CWPS,国产酶标板可替代进口酶标板,用于肺炎球菌疫苗临床血清特异性抗体含量的检测.

    肺炎链球菌细胞壁多糖96孔酶标板酶联免疫吸附试验适用性验证

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    维持细胞内蛋白稳态的分枝杆菌伴侣蛋白:Cpn60.1和Cpn60.2介导的蛋白质折叠的分子伴侣功能

    PIPLANI B罗妙燕杨俊杰
    39页
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    A型肉毒神经毒素双抗体夹心ELISA的建立及验证

    刘英朱衍志陆俭周易...
    40-47页
    查看更多>>摘要：目的 建立A型肉毒神经毒素双抗体夹心ELISA快速定量检测方法,并进行验证及初步应用.方法 通过杂交瘤细胞培养技术制备鼠抗A型肉毒神经毒素单克隆抗体,用ELISA及其他免疫学方法测定抗体效价、亚型及理化性质.优化出最佳试验方案,建立定量检测A型肉毒神经毒素的双抗体夹心ELISA,并对该方法的线性及范围、定量限、准确性、精密度(重复性、中间精密度)、专属性和耐用性进行验证.对本公司相关产品进行测试.结果 制备的A型肉毒神经毒素单克隆抗体纯度为88.15％,效价为1∶102 400,重链亚型为IgG1类,轻链为Kappa类;可与A型肉毒神经毒素的重链特异性结合.建立的A型肉毒神经毒素双抗体夹心ELISA在5.000～80.000 ng/mL范围内线性良好(r＞0.99);定量限为2.500 ng/mL;准确度介于80％～115％;CV＜15％;该方法与破伤风毒素、B、C、D、E和F型肉毒甘油毒素均无交叉;且A型肉毒神经毒素产品复溶后在2～8 ℃储存3 d,检测结果不受影响.应用该方法检测本公司开发的新型A型肉毒神经毒素产品,结果符合预期.结论 制备了鼠抗A型肉毒神经毒素单克隆抗体,建立了特异性好且灵敏度较高的A型肉毒神经毒素双抗体夹心ELISA,为A型肉毒神经毒素产品质量控制提供参考价值.

    A型肉毒神经毒素单克隆抗体杂交瘤细胞双抗体夹心ELISA

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    《微生物学免疫学进展》量和单位的书写规范

    47页
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    两种AH100-ATS高压均质机在汉逊酵母细胞破碎中适用性的研究

    王玢邵志伟杨林鹏陈卓涛...
    48-54页
    查看更多>>摘要：目的 评价150型AH100-ATS高压均质机和40型AH100-ATS高压均质机在汉逊酵母细胞破碎中的适用性.方法 用2种AH100-ATS高压均质机分别重复破碎3组汉逊酵母,每组细胞破碎3次,光学显微镜下观察并比较2种高压均质机破碎汉逊酵母细胞前后的形态;SDS-PAGE电泳检测破碎后细胞中目的蛋白的释出;血球计数板计数且计算破碎后的细胞破碎率;Bradford法检测及计算蛋白释出度;计时破碎所需要的时间.结果 光学显微镜下,2种高压均质机破碎汉逊酵母细胞前后的细胞形态均可见明显差别;150型AH100-ATS高压均质机破碎汉逊酵母细胞后释出蛋白的粒径分布体积比高于40型AH100-ATS高压均质机,差异有统计学意义(P＜0.05);SDS-PAGE电泳结果显示,150型AH100-ATS高压均质机破碎汉逊酵母后目的蛋白的灰度值高于40型AH100-ATS高压均质机,差异有统计学意义(P＜0.05).150型AH100-ATS高压均质机破碎汉逊酵母细胞3次后,细胞破碎率分别为24.16％、35.63％、48.67％,总细胞破碎率为65.70％;蛋白释出度分别为41.69％、38.29％、15.80％,破碎完成后总蛋白释出度为62.63％;平均使用时间分别为16.7、16.7、19.0 min,破碎完成后总时间为52.3 min.40型AH100-ATS高压均质机破碎破碎汉逊酵母细胞后细胞破碎率分别为16.10％、11.40％、28.78％,总细胞破碎率为58.41％;蛋白释出度分别为24.72％、21.04％、9.57％,破碎完成后总蛋白释出度为55.48％;平均使用时间分别为61.0、59.7、60.7 min,破碎完成后总时间为181.3 min.每次破碎的细胞破碎率、蛋白释出度、所需时间,以及总细胞破碎率、总蛋白释出度、总破碎时间,2种高压均质机差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 150型AH100-ATS破碎汉逊酵母的释出蛋白的粒径分布体积比、目的蛋白、细胞破碎率和蛋白释出度均高于40型AH100-ATS,150型AH100-ATS破碎所需的时间远少于40型AH100-ATS.150型AH100-ATS高压均质机可以用于中试大规模研究中汉逊酵母细胞的破碎,且较40型AH100B-ATS高压均质机破碎需要更短的时间,且具有更好的破碎效果.

    高压均质机汉逊酵母细胞高压均质破碎细胞破碎率蛋白释出度破碎时间

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