查看更多>>摘要:目的 探讨活性氧(ROS)响应靶向纳米粒(OXbCD NP)对细胞氧化应激和细胞炎症因子的影响.方法 采用化学键合方式自制ROS响应靶向纳米粒.(1)选用RAW264.7细胞,随机分为四组,空白1组(无任何处理),对照1组(PMA刺激),10 μg/mL OXbCD NP1组(10 μg/mL OXbCD NP孵育后再加入PMA刺激),100 μg/mL OXbCD NP1 组(100 μg/mL OXbCD NP孵育后再加入PMA刺激).用DCFH-DA探针染色,流式细胞术检测细胞内的ROS水平,并荧光成像;(2)选用RAW264.7 细胞,随机分为四组,空白 2 组(无任何处理),对照 2 组(IFN-γ和LPS刺激),10 μg/mL OXbCD NP 2 组(10 μg/mL OXbCD NP孵育后加入IFN-γ和LPS刺激),100 μg/mL OXbCD NP 2 组(100 μg/mL OXbCD NP孵育后加入IFN-γ和LPS刺激),用ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;(3)将RAW264.7细胞用0 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、40 μg/mL、80 μg/mL、160 μg/mL、320 μg/mL、640 μg/mL、1 280 μg/mL OXbCD NP培养液孵育12 h或24 h后,用MTT法检测细胞存活率.结果 (1)相比于对照1组,10 μg/mL和100 μg/mL OXbCD NP 1组ROS水平下降,荧光强度下降,差异有统计学意义(P<0.01);(2)与对照2组比较,10 μg/mL和100 μg/mL OXbCD NP 2组IL-1β、TNF-α水平下降,差异有统计学意义(P<0.01).(3)纳米粒与细胞共孵育12 h,与OXbCD NP水平为0 μg/mL(不含OXbCD NP)对比,OXbCD NP水平达到640 μg/mL及1 280 μg/mL时,存活率差异有统计学意义(P<0.05);当孵育时间为 24 h,与不含OXbCD NP对比,OXbCD NP水平为 320 μg/mL、640 μg/mL及1 280 μg/mL时,存活率差异有统计学意义(P<0.05).结论 ROS响应靶向纳米粒在细胞水平具有良好的安全性,并且有抗细胞氧化应激和抗炎症因子反应的作用.