查看更多>>摘要:[目的]探讨黄豆黄苷(glycitin,GL)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的成骨细胞凋亡和氧化应激损伤的保护作用,并探讨其可能的分子机制.[方法]应用DEX刺激MC3T3-E1细胞模拟激素性股骨头坏死(glucocorticoids-induced os-teonecrosis of the femoral head,GC-ONFH)体内的激素环境,根据细胞处理不同分为3组,对照组(blank control,BC):培养基中加入等量的 PBS;DEX组:培养基中加入浓度为 100 μmol/L 的 DEX;DEX+GL 组(dexamethasone+glycitin,DEX+GL):培养基中加入浓度为100µmol/L的DEX以及浓度为15 μmol/L的GL,干预时间为24 h,不分时间组.MC3T3-E1细胞传代常规培养48 h后,将细胞培养基更换为成骨诱导培养基.[结果]流式细胞检测方面,与BC组比较,DEX组细胞凋亡率显著增加,与DEX 组相比,DEX+GL 组细胞凋亡率显著降低[(9.8±1.5)%vs(17.7±1.4)%vs(13.6±0.4)%,P<0.001].RT-qPCR 检测方面,BC 组,DEX 组和 DEX+GL组的基因表达水平分别为,Collagen I[(1.0±0.0)vs(0.5±0.3)w(1.0±0.2),P=0.011],Runx-2[(1.0±0.0)vs(0.6±0.1)vs(1.1±0.0),P<0.001],Cleaved Caspase 3[(1.0±0.0)vs(1.3±1.3)vs(0.9±0.0),P=0.002]、Bax[(1.0±0.0)vs(1.4±0.3)vs(0.8±0.1),P=0.008],差异均有统计学意义.Western blot 检测方面,与 BC 组相比,DEX 组 ALP、Collagen Ⅰ、Runx-2、Bcl-2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平显著下降(P<0.05);与DEX组相比,DEX+GL组上述蛋白表达水平显著增加(P<0.05).与BC组相比,DEX组Cleaved Caspase 3、Bax的蛋白表达水平显著增加(P<0.05),与DEX组相比,DEX+GL组上述两指标的蛋白表达水平显著减少(P<0.05).与BC组相比,DEX组的细胞绿色荧光显著增强(P<0.05),与DEX组相比,DEX+GL组绿色荧光显著减弱(P<0.05).[结论]GL能够逆转DEX介导的成骨细胞成骨抑制、改善DEX介导的成骨细胞凋亡增加,保护DEX介导的成骨细胞氧化应激损伤,其机制可能与GL激活Wnt3a/β-Catenin信号通路有关.