查看更多>>摘要：背景 甲状腺自身抗体是诊断桥本甲状腺炎(HT)的标志,B淋巴细胞在HT的发病机制中发挥重要作用.Zeste同源物 2 增强子(EZH2)是一种表观遗传学蛋白,在淋巴细胞的发育与功能调控中扮演重要角色.目的 本研究探讨EZH2在HT甲状腺组浆母细胞及浆细胞中的表达,进一步探讨EZH2抑制剂在实验性自身免疫甲状腺炎(EAT)模型中的治疗作用.方法 收集北京大学第一医院 2010-2020 年 6 例行甲状腺手术的患者,取肿瘤对侧的甲状腺组织(HT及正常甲状腺组织各 3 例),通过RNA-seq筛选B淋巴细胞相关基因的表达情况;收集 16 例HT患者的甲状腺组织和 8 例健康对照(HD)甲状腺组织,分别利用免疫组化及免疫荧光验证EZH2 在HT甲状腺组织中B淋巴细胞中的表达;收集 25 例HT甲状腺细针穿刺液(FNA)、19 例HT外周血以及 12 例健康人外周血样本应用流式细胞分析检测EZH2 在浆母细胞及浆细胞中的表达改变.将 15 只 7 周龄NOD.H-2h4 小鼠EAT模型分为对照组(n=5)、EAT无注射(n=5)或注射EZH2 抑制剂GSK126 处理组(10 mg/kg,腹腔注射 3 次/周,n=5),8 周后观察甲状腺炎症程度及甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平的改变.结果 RNA-seq结果显示,相较于正常甲状腺组织,HT甲状腺组织中EZH2 水平上调,一些与B淋巴细胞表型相关的基因例如CD19、CD27、CD38、CD52 相应增加.免疫组化结果显示,16 例HT甲状腺组织标本中EZH2 免疫组化染色均可在生发中心(GC)见到阳性细胞,呈强阳性,8 例正常甲状腺组织染色中未观察到阳性细胞.HT甲状腺组织中EZH2染色高表达在GC区,EZH2特异性地表达在CD19+B淋巴细胞中.流式细胞术检测结果显示HT FNA样本中CD19+B淋巴细胞、浆母细胞及浆细胞比例均高于HD外周血、HT外周血样本(P<0.01),HT FNA样本中EZH2 在CD19+B淋巴细胞、浆母细胞中的阳性比例高于HT外周血(P<0.005).小鼠实验中,EAT组甲状腺的淋巴细胞浸润较对照组增加.GSK126 处理组炎症程度评分和TgAb水平高于对照组,低于EAT组(P<0.001).结论 EZH2 在HT甲状腺组织CD19+B淋巴细胞中表达异常升高,可能促进了B淋巴细胞分化成浆细胞进而促进自身抗体生成破坏甲状腺,EZH2 抑制剂可以减缓EAT模型甲状腺炎症程度.浆母细胞中EZH2 表达增加可能参与了HT的发病机制,EZH2 可能成为治疗HT的新靶点,相关机制需要进一步深入研究.
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