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期刊信息/Journal information
中国兽医科学
中国农业科学院兰州兽医研究所
中国兽医科学

中国农业科学院兰州兽医研究所

殷宏

月刊

1673-4696

zgsykx@zgsykx.com

0931-8342195

730046

甘肃省兰州盐场堡徐家坪1号

中国兽医科学/Journal Chinese Veterinary ScienceCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>《中国兽医科学》是由农业部主管、中国农业科学院兰州兽医研究所主办的兽医专业学术性期刊。继1999年获首届国家期刊奖、2003年获第二届国家期刊奖百种重点期刊奖之后，2005年又荣获第三届国家期刊奖提名奖。为全国百余种畜牧兽医类期刊中唯一获得国家期刊奖的期刊。 《中国兽医科学》办刊宗旨是：报道国内外兽医科学的研究进展和水平，推广兽医科学研究成果，反映国内外兽医科学研究动态，探讨新的兽医学理论和研究方法。主要栏目有：专家论坛、微生物学、寄生虫学、流行病学、药物学、中兽医学、普通病学、基础兽医学、综述专论、研究简报等。适于兽医科学研究人员、农业院校动物医学、动物科学专业师生阅读，也适合各级畜牧兽医技术人员和各级畜牧兽医行政管理人员参考。热忱欢迎广大兽医科研、教学及其他学科科技工作者踊跃投稿。本刊对所有来稿均采取双盲审稿，即将严格筛选的稿件送有关专家评审，作者不知审稿专家，审稿专家不知作者，以公平、公正地择优录用。经评审录用的文稿本刊力争在最短的时间内刊出。投稿者请登陆本刊网站参阅本刊投稿指南，投稿电子信箱：zgsykx@zgsykx.com。
正式出版
收录年代

    过表达JMJD6基因的293T细胞系的构建及对水疱性口炎病毒增殖效率的评价

    黄梦瑶杨帆杨洋邵文华...
    569-576页
    查看更多>>摘要：为提高水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)在细胞中的增殖效率,本研究利用慢病毒包装系统构建Jumonji C结构域蛋白 6(Jumonji domain-containing protein 6,JMJD6)过表达的HEK-293T/JMJD6 细胞系,分析VSV在HEK-293T/JMJD6 细胞系与HEK-293T细胞中的复制差异.首先以JMJD6 基因为目标,构建重组质粒pLV-puro-3×Flag-JMJD6,并与辅助质粒pMD2.G和psPAX2 共转染至HEK-293T细胞进行慢病毒包装.将包装好的慢病毒感染HEK-293T细胞并通过嘌呤霉素筛选获得过表达JMJD6 基因的阳性细胞.利用Western-blot、间接免疫荧光试验、流式细胞术和蚀斑试验检测VSV在HEK-293T/JMJD6细胞系中的复制能力.结果显示,在HEK-293T/JMJD6 细胞系中,VSV的复制能力显著增强.实时荧光定量检测VSV感染的HEK-293T/JMJD6 细胞系和野生型HEK-293T细胞中干扰素下游基因的表达,结果显示HEK-293T/JMJD6 细胞系抑制VSV诱导的Ⅰ型干扰素下游基因的产生.总之,本研究构建的HEK-293T/JMJD6 细胞系能显著促进VSV的增殖并抑制Ⅰ型干扰素信号通路,为VSV疫苗候选细胞株的筛选奠定了基础.

    JMJD6水疱性口炎病毒慢病毒包装过表达细胞系干扰素

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    宿主OAS2蛋白抑制非洲猪瘟病毒体外复制的研究

    赵思越史喜绢杨行张大俊...
    577-583页
    查看更多>>摘要：为了探究宿主蛋白 2′,5′-寡腺苷酸合成酶 2(OAS2)与非洲猪瘟病毒(ASFV)复制之间的关系,本研究通过蛋白免疫印迹(Western-blot)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析了ASFV 感染对宿主OAS2的调控作用;构建并合成OAS2 真核表达质粒以及siRNA干扰序列,通过RT-qPCR、Western-blot方法探究在MA-104 细胞中外源过表达OAS2 及在PAMs细胞中下调OAS2 表达对ASFV 体外复制的影响.结果显示,ASFV感染PAMs细胞后,OAS2 的蛋白水平和转录水平皆上调,并且外源过表达OAS2 显著抑制了ASFV的复制,下调OAS2表达促进了ASFV的复制.本研究通过对宿主蛋白OAS2进行过表达和敲低,证实了OAS2可以抑制ASFV体外复制,该结果为进一步研究宿主对ASFV的抗病毒免疫研究提供了理论基础.

    非洲猪瘟病毒OAS2天然免疫抑制

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    传染性皮下和造血器官坏死病毒RPA与CRISPR-Cas12a可视化快速检测方法的建立

    周傲白雪徐博文沙才华邵建宏...
    595-601页
    查看更多>>摘要：根据传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)基因序列的保守区域设计并合成多组RPA引物和特异性crRNA,经过筛选与优化,建立RPA-Cas12a系统荧光检测法和试纸条法 2 种可视化快速检测IHHNV的方法.结果显示,这 2 种可视化检测方法在 37℃恒温反应 40 min可检测出IHHNV;与对虾白斑综合征病毒、虾肝肠胞虫和十足目虹彩病毒 1 无交叉反应;该方法灵敏度较高,最低检测浓度为 10 copies/μL;应用该方法对 10 份IHHNV阳性临床样本进行检测,阳性检出率为 100%.综合结果表明,建立的荧光法和试纸条 2 种可视化检测IHHNV的方法操作简单,反应灵敏,适用于对虾养殖场或基层实验室对IHHNV的定期监测和初筛.

    传染性皮下和造血器官坏死病毒重组酶聚合酶扩增CRISPR-Cas12a检测方法

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    犬猫弓形虫病real-time荧光定量PCR检测方法的建立与应用

    施远国胡潇予柯艳坤李颖鑫...
    602-608页
    查看更多>>摘要：为建立一种灵敏性高、特异性强、可自动化检测犬猫弓形虫的分子学诊断方法,本研究提取弓形虫RH虫株DNA,以致密颗粒蛋白 7(GRA7)基因保守区为靶标,设计特异性引物并构建标准质粒pMD18-GRA7,以标准质粒pMD18-GRA7 作为模板,建立SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR(real-time PCR or qPCR)检测方法.结果显示,该方法特异性引物只能扩增出弓形虫DNA样品,对阴性样品及其他犬猫寄生虫阳性样品DNA则未见扩增曲线.所建qPCR方法的检测下限为 3 copies,当标准品浓度为 3 copies/μL时,检测Ct值为29.4.对犬猫临床样品进行检测,并与商品化试剂盒结果相比校,阴阳性符合率达 100%.上述结果表明,本研究建立的SYBR-Green Ⅰ荧光定量PCR方法特异性好,敏感性强,结果稳定,可用于犬猫弓形虫病的临床检测.

    弓形虫犬猫GRA7实时荧光定量PCR

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    H9N2禽流感病毒HA蛋白mRNA疫苗的构建表达及鉴定

    花悦宋奇珊王东东杨思敏...
    609-614页
    查看更多>>摘要：H9N2 亚型禽流感病毒(AIV)是严重危害家禽养殖业的病原,由于目前的疫苗无法应对突发的AIV 疫情,因此本研究设计一种基于血凝素(HA)基因的抗H9N2 亚型禽流感病毒mRNA 疫苗.在原有Puc57 克隆载体基础上,构建mRNA体外转录模板,将PCR得到的HA基因和EGFP基因插入模板中构建重组质粒Puc57-HA和Puc57-EGFP.将重组质粒线性化后,进行体外转录、加帽、加尾、纯化等一系列修饰并转染鸡成纤维细胞(DF-1),观察 48 h荧光表达情况,并用Western-blot检测HA蛋白在细胞中的表达.结果显示,48 h出现绿色荧光,Western-blot显示HA蛋白成功表达.本试验为H9N2 禽流感mRNA疫苗的研制奠定了基础.

    禽流感mRNA疫苗体外转录

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    大熊猫LIF基因的原核表达及其单克隆抗体的制备与鉴定

    刘项宇张梦诗李非平王神飞...
    624-631页
    查看更多>>摘要：为获得大熊猫LIF单克隆抗体,将大熊猫LIF基因编码区 23～203 基因片段添加酶切位点合成后连接到pET30a原核表达载体上,转化BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达、纯化蛋白后作为免疫原,对BALB/c小鼠进行免疫,并按照常规方法制备杂交瘤细胞,应用间接ELISA方法筛选鉴定阳性杂交瘤细胞株.结果显示,成功构建了LIF(23-202)-pET30a重组质粒,获得了高纯度的LIF重组蛋白免疫原,得到 1 株能分泌大熊猫LIF单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌的抗体亚型为IgG2b.Western-blot结果显示,LIF-2 单克隆抗体可特异性识别大熊猫子宫内膜间质细胞、睾丸支持细胞、皮肤细胞、脐带间充质干细胞及骨髓间充质干细胞中的LIF蛋白.上述结果为阐明LIF的定位和组织表达信息,探讨LIF在大熊猫胚胎着床中的作用奠定了重要基础.

    大熊猫LIF单克隆抗体杂交瘤细胞免疫印迹

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    重组犬IFN-α的原核表达及抗病毒活性研究

    李乐琴曹众达李海珠杜吉革...
    632-640页
    查看更多>>摘要：本试验旨在建立犬α干扰素(CaIFN-α)原核表达及纯化方法,并对其抗病毒活性进行研究.通过构建pET-28a/CaIFN-α表达载体,高效表达和纯化rCaIFN-α;采用CCK-8 法在犬肾细胞(MDCK)上测定rCaIFN-α 的细胞毒性,在 MDCK/VSV 系统中测定其抗病毒活性效价;RT-qPCR 检测 rCaIFN-α 作用MDCK细胞后下游ISGs的表达水平;进一步利用TCID50 和间接免疫荧光(IFA)测定rCaIFN-α抗犬副流感病毒(CPIV)和犬瘟热病毒(CDV)的感染能力.电泳和Western-blot结果显示,成功制备原核表达的特异性rCaIFN-α;CCK-8 结果显示重组蛋白无明显细胞毒性,细胞病变抑制法测定抗VSV 病毒活性效价为1.39×107 U/mL;RT-qPCR 显示rCaIFN-α 可显著上调ISG15、Mxl 等ISGs 的转录水平;IFA 等结果显示,rCaIFN-α对CPIV和CDV具有良好的抗病毒作用.结果表明,本试验制备的rCaIFN-α具有优良的抗病毒感染活性,为进一步研发新型宠物抗病毒制剂奠定了基础.

    犬IFN-α原核表达干扰素刺激基因(ISGs)抗病毒活性

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    奶山羊隐性乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及毒力基因的检测

    杨雪娇王一涵项勋平宇明...
    650-657页
    查看更多>>摘要：为了探究某规模化养殖场奶山羊隐性乳房炎致病菌的情况,采用体细胞计数法对奶山羊乳样进行隐性乳房炎检测,对阳性乳样中的细菌进行分离纯化、形态学鉴定、生化鉴定及分子生物学鉴定.通过动物实验验证分离株的致病性,利用PCR检测致病菌携带的毒力基因,采用纸片法对致病菌进行药敏试验.结果显示,该羊场隐性乳房炎的阳性率为 68.9%;从 40 份乳样中分离并鉴定出 14 株细菌,其中 8 株金黄色葡萄球菌分离株对小鼠有较强致病性,分离株KM4 对小鼠半数致死量为 1.8×108 CFU/mL.毒力基因检测结果显示,hla、hlb、clfA、sec、fnbpA和tsst-1 检出率均为 100%.药敏结果显示,分离株对青霉素和氨苄西林耐药率为 100%,对林可霉素耐药率为 12.5%,对头孢曲松和头孢他啶敏感率为 37.5%,对其他药物全部敏感.

    奶山羊隐性乳房炎金黄色葡萄球菌耐药性毒力基因

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    新疆部分地区马粪源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性及毒力基因检测

    李静刘鏊陀海欣于月通...
    658-665页
    查看更多>>摘要：为调查新疆 4 个地区马源大肠杆菌的携带情况,采集 56 份马粪便样本进行大肠杆菌分离鉴定,采用药敏纸片法和结晶紫微孔板法对分离株进行相关特性测定,并对其毒力基因和耐药基因进行检测.结果显示:从 56 份样本中分离到 41 株大肠杆菌,分离率为 73.2%(41/56);分离株对利福平(97.6%)、头孢噻吩(46.3%)、复方新诺明(29.3%)、四环素(24.4%)和氯霉素(19.5%)等表现出不同程度的耐药性;分离株中,生物被膜形成能力中等的有 7 株(17.1%,7/41),弱的有 32 株(78.0%,32/41),不形成的有 2 株(4.9%,2/41);从 16 种毒力基因中,共检出fimC(87.8%,36/41)、fyuA(58.5%,24/41)、irp2(41.5%,17/41)、sepA(36.6%,15/41)和hlyF(22.0%,9/41)5种毒力基因;从11种耐药基因中,共检出parC、gyrA和gyrB(100.0%,41/41),sul2(31.7%,13/41)、floR(22.0%,9/41)、blaTEM(22.0%,9/41)、blaCTX(12.2%,5/41)和aadA(2.4%,1/41)8 种耐药基因.结果表明:新疆 4 个地区的马源大肠杆菌针对不同抗生素具有不同程度的耐药性,此外,这些菌株可形成生物被膜,并且携带有多种毒力基因和耐药基因.为新疆马源大肠杆菌病的临床用药和防治提供了试验数据.

    大肠杆菌生物被膜形成毒力基因耐药基因马新疆

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    华支睾吸虫排泄/分泌产物对肝纤维化的影响

    孙云异魏伟毛瑞锋张馨慧...
    666-673页
    查看更多>>摘要：为了探讨华支睾吸虫排泄/分泌产物(ESPs)对大鼠肝星状细胞(HSCs)的影响,采用不同质量浓度的华支睾吸虫ESPs(CsESPs)处理HSC-T6 细胞,利用CCK8 法检测CsESPs对HSC-T6 细胞活力的影响,并以MCC950 预处理细胞作为对照,利用RT-qPCR和Western-blot分别检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA、Col1α1 和Col3α1 的基因和蛋白表达水平.结果显示,与对照组相比,25、50 和 100 μg/mL的CsESPs对细胞活力无明显影响;当CsESPs的质量浓度达到 50 μg/mL时,与对照组相比,NLRP3 及其下游的Caspase-1、IL-1β基因的相对表达水平显著升高,HSC-T6 细胞激活的标志基因α-SMA及纤维化相关的Col1α1 基因的相对表达水平也显著升高;Western-blot结果显示,与对照组相比,50 μg/mL的CsESPs可以使 HSC-T6 细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA、Col1α1 及Col3α1 的蛋白表达水平显著升高,而在MCC950 预处理细胞组,这 6 个指标的基因和蛋白表达水平均被明显抑制.结果表明,CsESPs 可以使HSC-T6 细胞活化,诱导细胞内NLRP3 炎性小体活化及胶原表达,NLRP3 炎性小体活化是华支睾吸虫感染所致肝纤维化的关键环节之一.

    华支睾吸虫排泄/分泌产物肝星状细胞NLRP3炎性小体肝纤维化

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