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中国兽医学报
中国兽医学报

王哲

月刊

1005-4545

xbcjvs@163.com

0431-87836534

130062

长春市西安大路5333号

中国兽医学报/Journal Chinese Journal of Veterinary ScienceCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本学报是由解放军军需大学主办的兽医专业学术性期刊，是国内兽医界最有影响的权威性核心期刊之一。被CA、CAB、AGRIS、中国生物学文摘、中国农业文摘及中国科学引文索引等近20种国内外数据库或检索性刊物收录。《中文核心期刊要目总览》列为中国兽医科学核心期刊。中科院医学信息研究所确定其为中国生物医学核心期刊。
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    马链球菌兽疫亚种荧光定量PCR检测方法的建立及在入境马匹回顾性检测分析中的应用

    胡雨桐周学慧赵梦茹陈翔...
    1735-1742页
    查看更多>>摘要：为建立一种针对马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subspecies zooepidemicus,SEZ)快速、特异、敏感的检测方法,并了解SEZ在入境我国马匹中的感染情况,试验首先根据SEZ标准菌株(ATCC 43079)的保守基因comB设计合成特异性引物,经PCR扩增后构建pMD19-T-comB重组质粒,以此为标准品模板建立基于SYBR Green Ⅰ染料的荧光定量PCR检测方法(quantitative PCR,qPCR);进而利用所建方法对2018-2023年由荷兰、比利时、日本、德国、阿根廷和新西兰等6个国家入境我国口岸的477份马血清样本进行SEZ感染情况的检测分析.结果发现本试验所建立的qPCR检测方法特异性良好,仅对SEZ存在特异性扩增;敏感性试验表明该方法最低检测量为4.58 × 101 copies/μL;重复性试验检测结果显示批内重复性变异系数均小于0.5％,批间重复性变异系数均低于3.0％,表明重复性良好,稳定性高.回顾性检测分析显示2018年荷兰入境的共40份样本均为阴性(0/40);2019年比利时入境样本中检测到1份阳性(1/20),日本和德国入境样本均为阴性(0/36);2021年日本样本中3份为阳性(3/34),阿根廷1份为阳性(1/20),荷兰均为阴性(0/40);2022年荷兰76份样本均为阴性(0/76);2023年荷兰126份样本检出阳性样本5份(5/126),新西兰88份样本中检出阳性1份(1/88).总计阳性样本11份,阳性率为2.31％(11/477),总体阳性率较低.结果说明,成功建立了用于检测SEZ的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,其对我国出入境、口岸部门的快速检疫以及该病的流行病学调查等工作提供了必要的技术支撑.

    马链球菌兽疫亚种荧光定量PCRSYBRGreenⅠ马

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    短链脂肪酸丁酸增强巨噬细胞预防问号钩端螺旋体的急性感染

    陈曦谢旭峰刘鑫刘久茜...
    1743-1748页
    查看更多>>摘要：钩端螺旋体病(钩体病)是一种全球性自然疫源性人兽共患传染病.研究表明,肠道菌群代谢产物短链脂肪酸参与宿主免疫调节、影响疾病进程.本试验旨在探究肠道菌群代谢产物短链脂肪酸在钩体病中的作用.结果表明,补充短链脂肪酸丁酸能显著提高金黄地鼠钩体病存活率.体外试验表明,丁酸处理抑制感染钩体后巨噬细胞Cat和Gsr基因表达,但上调了 NOX1和NOX4基因表达.同时,丁酸刺激增加了感染钩体巨噬细胞ROS水平,而高水平的ROS可增强巨噬细胞杀菌功能.体内试验也证实丁酸通过调节ROS的产生保护金黄地鼠抵抗急性钩端螺旋体病.综上所述,肠道菌群代谢产物短链脂肪酸丁酸通过调节ROS表达增强巨噬细胞杀菌功能,从而保护宿主抵抗钩体病.

    丁酸钩体病ROS巨噬细胞肠道菌群

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    巴马香猪与长白猪骨骼肌卫星细胞增殖分化差异

    任思禹李颖
    1749-1754,1781页
    查看更多>>摘要：猪肉的质量与猪骨骼肌的发育和肌内脂质沉积有关,而骨骼肌卫星细胞具有分化为成肌细胞、脂肪细胞的潜能.为分析骨骼肌卫星细胞的增殖分化对骨骼肌形成的影响,本研究从长白猪和巴马香猪背最长肌处分离纯化骨骼肌卫星细胞,并利用免疫荧光检测Pax7的表达情况进行细胞鉴定.通过RT-qPCR检测2个品种猪骨骼肌卫星细胞中细胞周期相关因子和成肌成脂相关因子的mRNA表达量,CCK-8检测2种细胞的增殖情况.结果表明,2个品种猪骨骼肌卫星细胞表现出不同的增殖能力和分化潜能:与巴马香猪相比,长白猪骨骼肌卫星细胞表现出较强的增殖能力和较高的成肌分化潜能以及较低的成脂分化潜能.本研究发现不同肉质猪骨骼肌卫星细胞增殖分化能力存在差异,为阐明不同肉质猪骨骼肌形成差异的相关机理提供了理论依据.

    骨骼肌卫星细胞增殖分化猪

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    三七提取物通过IL-6、CASP3和STAT3调节免疫应激肉鸡炎症反应

    杜林杨萍瑞周翰林邱莉娟...
    1755-1764页
    查看更多>>摘要：旨在观察三七提取物对免疫应激肉鸡炎症反应的影响,并通过网络药理学和分子对接结合体内动物试验对其机理进行探讨.根据TCMSP数据库及GeneCard等疾病数据库寻找三七及肉鸡炎症相关靶点,应用Cytoscape 3.7.1和String数据库分别进行关键化合物和靶点的筛选,并构建中药-关键成分-靶点网络关系图;通过DAVID平台进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,依托于chiplot在线网站进行可视化,最后通过Pymol软件对核心聚类蛋白进行分析得到核心作用靶点,使用分子对接技术预测活性成分与核心靶点匹配程度以及动物试验进一步探索三七提取物的药效机制.动物试验将60只1日龄红羽肉鸡,随机分为3组(LPS组、CON组、PN组),试验周期为35 d.LPS组和PN组在第12、14、33和35天以250 μg/kg腹腔注射LPS,CON组腹腔注射等量的无菌生理盐水.采用ELISA法检测三七提取物对血清中炎性细胞因子的影响,同时检测各组血清中的激素含量,荧光定量PCR检测各组对STAT3、IL-6和CASP3的mRNA表达水平的影响.结果表明,在第2和5周,LPS攻毒后,血清中IFN-γ、IL-6、iNOS、TNF-α和TNF-β含量显著增加(P＜0.05),而IL-10含量显著下降(P＜0.05).而与LPS组相比,基础日粮中添加三七提取物后血清中IFN-γ、IL-6、iNOS、TNF-α和TNF-β的含量显著下降(P＜0.05),IL-10含量显著增加(P＜0.05),并且三七提取物显著降低了血清中促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)的水平(P＜0.05),提高了生长激素(GH)的水平(P＜0.05).网络药理学共预测了 8种有效成分和123个肉鸡炎症的潜在靶点.三七对肉鸡炎症的保护机制可能与C型凝集素受体(CLR)信号通路、Toll样受体(TLR)信号通路、MAPK信号通路、NOD样受体(NLR)信号通路和FoxO信号通路有关.根据预测,三七缓解肉鸡炎症反应可能与作用于12个关键靶点有关.荧光定量PCR显示,三七提取物下调了 IL-6和CASP3的mRNA表达(P＜0.05),上调了 STAT3的mRNA表达(P＜0.05).分子对接结果也显示三七提取物中的有效成分可通过IL-6和CASP3发挥抗炎作用.结果提示,三七提取物可能通过多成分、多靶点、多途径缓解免疫应激肉鸡炎症反应,本研究有利于提出新的治疗策略并为开发以赶黄草提取物为主的饲料添加剂提供理论依据.

    三七鸡炎症网络药理学分子对接

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    去甲泽拉木醛与美罗培南对NDM-1阳性大肠杆菌的协同抗菌作用

    刘智营郭岩徐蕾刘洪涛...
    1765-1772页
    查看更多>>摘要：旨在探究去甲泽拉木醛与美罗培南对New Delhi Metallo-β-lactamase-1(NDM-1)阳性大肠杆菌的协同抗菌作用.首先通过酶活性抑制试验、分子对接试验确定去甲泽拉木醛对NDM-1蛋白水解活性的抑制作用及机制,其次通过棋盘法-最小抑菌浓度试验、生长曲线试验、药敏试验验证去甲泽拉木醛与碳青霉烯类抗生素美罗培南的协同抑菌作用,进一步通过杀菌曲线试验、活死细菌染色试验、膜完整性试验确定两者的协同杀菌作用,最后通过大蜡螟感染模型验证去甲泽拉木醛与美罗培南的体内治疗效果.结果显示,去甲泽拉木醛能够显著抑制NDM-1的水解活性(1C50=0.32 mg/L),并对美罗培南与NDM-1蛋白的结合产生竞争作用.体外试验表明去甲泽拉木醛与美罗培南有良好的协同抗菌作用,并可通过增加美罗培南对细菌的膜损伤作用发挥协同杀菌作用;体内试验表明去甲泽拉木醛可将美罗培南的保护效果从67％提高至80％.本研究为治疗NDM-1阳性大肠杆菌感染提供了一种治疗策略和抗菌增效剂.

    去甲泽拉木醛NDM-1,美罗培南,协同抗菌

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    甘草多糖对H2O2诱导肉鸡肝细胞氧化应激损伤的保护作用

    王雪莹侯惠宁安永升卢佳...
    1773-1781页
    查看更多>>摘要：探讨甘草多糖对氧化应激造成的肉鸡肝细胞损伤的保护作用,并对其作用机制进行研究.以体外培养的原代肉鸡肝细胞为空白对照组,同时设置H2O2诱导组、甘草多糖组、H2O2+甘草多糖组,用CCK-8试剂检测肉鸡肝细胞活性,JC-1和DAPI染色试剂盒检测细胞凋亡,相关试剂盒检测GSH-Px、SOD、CAT、MDA含量和T-AOC水平,qRT-PCR检测肉鸡肝细胞中抗氧化基因Nrf2、Keap-1、GPx1、SOD、CAT和炎症基因TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-4、IL-10的相对表达量.结果表明,与H2O2诱导组相比,甘草多糖预处理可明显提升肉鸡肝细胞活性,减少细胞凋亡;与H2O2诱导组相比,甘草多糖预处理可明显提高细胞GSH-Px、SOD、CAT、MDA含量和T-AOC水平,抑制MDA生成;qRT-PCR检测显示,甘草多糖可显著提高Nrf2、Keap-1、GPx1、SOD、CAT、IL-4、IL-10的相对表达量,同时显著降低MyD88、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β的相对表达量.甘草多糖可能通过激活Nrf2信号通路提高抗氧化酶的活性,并抑制TLR4信号通路,从而明显改善肉鸡肝细胞的氧化应激损伤.

    甘草多糖肉鸡肝细胞氧化应激

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    基于代谢组学方法研究阿司匹林丁香酚酯对大鼠代谢的影响

    陶琦范丽萍过海天马宁...
    1782-1792页
    查看更多>>摘要：探究阿司匹林丁香酚酯(aspirin eugenol ester,AEE)对大鼠代谢的影响,首先配制合适浓度的AEE混悬液.将Wistar大鼠随机分为3组,分别为正常组、AEE低剂量组(18 mg/kg)和AEE高剂量组(72 mg/kg).给药组大鼠每日灌服给药1次,正常组Wistar大鼠每日灌服1次等体积的0.5％羧甲基纤维素钠溶液.连续灌服7 d后收集粪便和尿液,应用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(UPLC-QTOF-MS/MS)对大鼠粪便和尿液进行非靶向代谢组学分析,并进行Metabo Analyst 5.0代谢通路富集分析.结果显示,本试验所选的AEE剂量对大鼠的生长未见影响;在大鼠粪便与尿液中分别鉴定出10个和8个差异代谢物,涉及到的代谢通路主要有苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢、类固醇激素生物合成、不饱和脂肪酸的生物合成、氨基糖和核苷酸糖代谢、脂肪酸生物合成和β-丙氨酸代谢等.结果表明,给药组大鼠体质量无显著影响(P＞0.05),但大鼠的代谢受到影响.粪便代谢物主要涉及的代谢通路包括:不饱和脂肪酸的生物合成、酪氨酸代谢、脂肪酸生物合成和类固醇激素生物合成;尿液代谢物主要涉及的代谢通路包括:嘌呤代谢、脂肪酸生物合成、精氨酸和脯氨酸代谢.因此,AEE对大鼠代谢影响主要与调节脂质代谢、氨基酸代谢、能量代谢等密切相关.试验结果为AEE在动物体内药效和临床应用提供一定的理论参考.

    阿司匹林丁香酚酯(AEE)粪便尿液代谢组学UPLC-QTOF-MS/MS

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    壬基酚诱导肝细胞氧化损伤及铁死亡机制研究

    王雨欣陈丹娜雷卓凡邹颜璐...
    1793-1799页
    查看更多>>摘要：旨在研究壬基酚(nonylphenol,NP)致肝细胞损伤的机制.通过建立NP诱导BRL-3A肝细胞损伤体外模型,评估肝细胞氧化损伤标志物变化、肝细胞Fe2+含量变化,观察肝细胞超微结构,检测铁死亡标志蛋白表达水平.结果显示,NP可引起BRL-3A细胞ROS、MDA显著升高(P＜0.05);GSH含量、GSH-Px活性和SOD活性显著降低(P＜0.05);Fe2+含量显著升高(P＜0.05),并呈现剂量依赖性;BRL-3A细胞线粒体体积明显变小,线粒体嵴断裂甚至消失,有的线粒体呈现空泡化;铁稳态相关蛋白TFR1和FTH1蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结果表明,铁死亡参与NP诱导肝细胞损伤机制,为深入探究NP致病机理提供了参考.

    铁死亡氧化损伤壬基酚BRL-3A细胞

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    党参皂苷对跨H9N2 AIV感染肺微血管内皮侵袭细胞功能的影响

    乔畅刘翔冯波穆祥...
    1800-1806页
    查看更多>>摘要：为探讨党参皂苷对H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)感染引起机体免疫抑制的调控作用,首先应用不同质量浓度(5、10、20 mg/L)党参皂苷孵育大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cells,RPMECs),采用RT-PCR和流式细胞术检测PD-L1表达水平变化,并以ELISA试剂盒检测上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-10含量及空斑法检测上清液中H9N2 AIV的滴度.然后利用8 μm孔径Trans well板建立RPMECs和T细胞共培养体系,以模仿循环T细胞跨过微血管迁移到病毒感染部位的过程.在Transwell上室中培养RPMECs,用H9N2 AIV接种RPMECs,1 h后加入含20 mg/L党参皂苷的培养基,36 h后加入T细胞.作用8 h后,收集下室中的T细胞,用流式细胞仪检测CD4+T细胞和CD8+T细胞的比例,用ELISA试剂盒检测上清液中IL-2、IFN-γ和Granzyme B的表达水平,流式细胞分选技术检测Perforin-1阳性T细胞的比例,MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测T细胞的增殖活性,Annexin V-FITC/PI对T细胞染色后用流式细胞仪检测凋亡细胞的百分比.结果显示,党参皂苷可显著降低H9N2 AIV感染诱导的RPMECs中PD-L1的表达水平、1L-10及TNF-α表达量,降低T细胞凋亡率,但可显著提高跨内皮迁移T细胞中IL-2、IFN-γ、Perforin-1和Granzyme B的表达量及T细胞的增殖活性.结果表明,党参皂苷可显著抑制RPMECs中H9N2 AIV诱导的PD-L1的表达,增强跨内皮细胞层迁移T细胞的抗病毒功能,有利于增强宿主对H9N2 AIV抵抗能力.

    党参皂苷微血管内皮细胞PD-L1T细胞H9N2AIV

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    黄芪多糖合生元对大肠杆菌性犊牛腹泻粪便评分和血清指标的影响

    陈俊薛晨曦刘梦林李心慰...
    1807-1812页
    查看更多>>摘要：为探讨黄芪多糖合生元对大肠杆菌性犊牛腹泻粪便评分和血液指标的影响,本研究选择品种相同(荷斯坦),日龄相近(6～9日龄),体质量相近(44.56±5)kg的20头大肠杆菌性腹泻犊牛,使用单因素完全随机设计分为对照组和试验组.试验期10 d,试验期内对照组与试验组犊牛每天肌肉注射博落回注射液(1 mg/kg)+恩诺沙星注射液(20 mg/kg)进行治疗,试验组犊牛除正常治疗方案外每天在饲奶中添加20 g黄芪多糖合生元制剂.试验期内每天上午9:00采集各组犊牛粪便进行粪便评分,试验期结束采集颈静脉血进行血液相关指标的检测.结果表明,试验组比对照组腹泻率下降17％,但粪便评分无显著统计学差异;试验组比对照组免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)含量分别增加54.81％和60.40％(P＜0.01),免疫球蛋白G(IgG)和白细胞介素-10(IL-10)含量分别增加50.89％和46.80％(P＜0.05),而白细胞介素-6(IL-6)含量减少28.99％(P＜0.05),白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)含量分别减少20.88％和37.10％(P＜0.01);试验组D-乳酸(D-LA)和内毒素(LPS)比对照组分别降低47.46％和65.31％(P＜0.01),二胺氧化酶(DAO)活性降低30％(P＜0.01);试验组比对照组总超氧化物歧化酶(T-SOD)含量增加12.78％(P＜0.05),过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性分别增加53.09％和60.57％(P＜0.01),而丙二醛(MDA)含量降低33.29％(P＜0.01).结果表明,黄芪多糖合生元制剂可以缓解大肠杆菌性腹泻犊牛的肠黏膜损伤,提高机体免疫力并提升抗氧化应激能力,降低致病菌和氧化应激对肠黏膜通透性的影响.

    黄芪多糖合生元犊牛腹泻粪便评分免疫球蛋白氧化应激

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