查看更多>>摘要:目的 探讨缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)大鼠海马的表达及其对细胞凋亡及抑郁样行为的影响.方法 60只6~8周龄SPF级雄性SD大鼠,按随机数字表法分为5组(每组12只):正常组、卒中组、抑郁组、PSD组、甘珀酸(carbenoxolo-ne,CBX)组.采用内皮素-1注射法建立卒中模型,慢性不可预见性温和性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)结合孤养建立抑郁模型.PSD组大鼠在卒中造模第7天给予CUMS及孤养.CBX组在PSD造模第14天给予腹腔注射CBX(20 mg/kg).采用糖水偏爱实验、旷场实验评价大鼠抑郁行为,RT-PCR 检测大鼠组织海马 Cx43 mRNA 表达,Western blot 检测 Cx43、caspase-3、Bax、Bcl-2 的蛋白表达水平,TUNEL染色检测细胞凋亡变化.采用SPSS 23.0软件进行统计分析,行为学数据采用重复测量方差分析,其他数据多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验.结果 (1)5组大鼠糖水偏爱率及穿格次数比较,时间和组别的交互作用均显著(F交互=35.57,111.43,均P<0.05).在术后28 d,抑郁组、PSD组糖水偏爱率及穿格次数均低于卒中组(均P<0.05),CBX组糖水偏爱率、穿格次数均低于PSD组(均P<0.05).(2)5组大鼠Cx43 mRNA、Cx43蛋白水平比较均差异有统计学意义(F=273.57,64.56,均 P<0.05).抑郁组[(0.59±0.05),(0.69±0.08)]与 PSD 组[(0.61±0.07),(0.63±0.12)]Cx43 mRNA 及 CX43 蛋白水平均低于卒中组[(1.01±0.03),(1.05±0.08)](均 P<0.05).CBX 组 Cx43 mRNA 及 Cx43 蛋白水平[(0.30±0.01),(0.37±0.09)]均低于PSD组(均P<0.05).(3)5组大鼠caspase-3、Bax、Bcl-2的蛋白水平及Bcl-2/Bax、细胞凋亡率均差异均有统计学意义(F=102.40,90.27,47.42,159.99,115.21,均 P<0.05).卒中组[(0.44±0.06),(0.54±0.07),(29.16±5.03)]与抑郁组[(0.45±0.07),(0.59±0.09),(27.00±4.93)]caspase-3、Bax蛋白水平、细胞凋亡率均高于正常组[(0.21±0.08),(0.33±0.07),(4.83±3.18)](均P<0.05),卒中组[(0.80±0.04),(1.51±0.20)]与抑郁组[(0.60±0.09),(1.03±0.09)]Bcl-2 蛋白水平及 Bcl-2/Bax均低于正常组[(1.04±0.13),(3.14±0.38)](均 P<0.05).PSD 组 caspase-3、Bax 蛋白水平、细胞凋亡率[(0.76±0.05),(0.84±0.02),(44.50±3.83)]均高于卒中组与抑郁组(均 P<0.05),PSD 组Bcl-2 蛋白水平、Bcl-2/Bax[(0.50±0.14),(0.59±0.17)]均低于卒中组与抑郁组(均 P<0.05).CBX组 caspase-3、Bax 蛋白水平、细胞凋亡率[(1.03±0.10),(1.02±0.05),(56.00±4.81)]均高于 PSD 组(均 P<0.05).CBX 组 Bcl-2 蛋白水平、Bcl-2/Bax[(0.26±0.08),(0.25±0.08)]均低于 PSD 组(均 P<0.05).结论 PSD模型大鼠海马Cx43表达下调,可促进细胞凋亡发生,进而加重抑郁行为.