查看更多>>摘要:从长链非编码RNA肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1)调控软骨细胞胆固醇代谢角度,探讨透骨消痛胶囊(Tougu Xiaotong Capsules,TGXTC)延缓骨关节炎退变的作用与机制.8周龄C57BL/6小鼠48只经适应性喂养1周后,随机数字表法分为空白组12只、造模组36只,造模组动物经5%异氟醚吸入麻醉后,采用Hulth法诱导骨关节炎(OA)模型,随机分为模型组12只、阳性药组(牛磺熊去氧胆酸)12只、透骨消痛胶囊组12只.阳性药组予以牛磺熊去氧胆酸500 mg·kg-1进行灌胃;透骨消痛胶囊组予以透骨消痛胶囊368 mg·kg-1进行灌胃;空白组和模型组给予等量生理盐水灌服,连续灌胃4周.干预结束后,麻醉下处死各组小鼠,分离与收集膝关节软骨组织.通过形态学染色观察小鼠膝关节软骨组织结构变化;通过real-time PCR检测小鼠软骨组织中lncRNA MALAT1水平变化;通过Western blot检测小鼠关节软骨中ATP结合盒转运体A1(ABCA1)、载脂蛋白A1(ApoA1)、肝X核激素受体β(LXRβ)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、胱天蛋白酶(caspase)-3蛋白表达情况.使用慢病毒包被的质粒进行敲减肺腺癌转录本1(sh-MALAT1)转染小鼠软骨细胞;real-time PCR检测sh-MALAT1转染小鼠软骨细胞中lncRNA MALAT1基因水平;Western blot检测透骨消痛胶囊对lncRNA MALAT1敲低后,毒胡萝卜素(thapsigar-gin,TG)诱导的小鼠软骨细胞ABCA1、ApoA1、LXRβ、CHOP、caspase-3蛋白含量表达情况.流式细胞术检测透骨消痛胶囊对lncRNA MALAT1敲低后TG诱导的小鼠软骨细胞凋亡率影响.苏木精-伊红(HE)染色与番红0染色结果显示,与模型组比较,透骨消痛胶囊组、阳性药组软骨层结构基本完整,关节结构破坏程度显著改善,软骨基质被番红0染色显著增强;与模型组比较,透骨消痛胶囊组、阳性药组中lncRNA MALAT1水平明显降低;与模型组比较,透骨消痛胶囊组、阳性药组的ABCA1、ApoA1、LXRβ蛋白含量表达显著增高,CHOP、caspase-3蛋白含量表达显著降低.与TG组比较,TG+sh-MALAT1组的lncRNA MALAT1水平下降;与TG+透骨消痛胶囊组比较,TG+sh-MALAT1+透骨消痛胶囊组的lncRNA MALAT1水平升高;Western blot结果显示,与模型组比较,透骨消痛胶囊组ABCA1、ApoA1、LXRβ、CHOP、caspase-3蛋白含量表达显著降低,lncRNA MALAT1敲低后,透骨消痛胶囊对TG诱导的小鼠软骨细胞中ABCA1、ApoA1、LXRβ、CHOP、caspase-3调控作用及凋亡率影响减弱.透骨消痛胶囊可改善OA软骨细胞胆固醇代谢紊乱,进而延缓OA退变,与调控lncRNA MALAT1关系密切.