查看更多>>摘要:目的 探讨N6-甲基腺苷(m6A)修饰相关基因在原发性痛风性关节炎(GA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其可能的作用.方法 收集2023年10月至12月期间在川北医学院附属医院风湿免疫科门诊就诊的急性期痛风患者(AG组)、间歇期痛风患者(IG组)、年龄及性别匹配的健康体检者(HC组)各45例.采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测m6A修饰相关基因[甲基转移酶3(METTL3)、甲基转移酶14(METTL14)、Wilms肿瘤1相关蛋白(WTAP)、肥胖相关蛋白(FTO)、AlkB同系物5(ALKBH5)、胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白(IGF2BP)2、IGF2BP3、含YTH结构域结合蛋白1(YTHDF1)和含YTH结构域蛋白2(YTHDC2)]在3组PBMCs中的表达水平,并与临床指标进行相关分析.计量资料符合正态分布采用方差分析或t检验,非正态检验用Kruskal-Wallis H检验和Mann-Whitney U检验分析数据.采用受试者特征曲线(ROC)评估m6A修饰相关基因对诊断GA的价值.结果 ① IGF2BP2(Z=-3.59,P<0.001)、WTAP(Z=-5.25,P<0.001)、METTL14(Z=-3.62,P<0.001)、YTHDF1(Z=-2.12,P=0.034)、YTHDC2(Z=-2.00,P=0.045)在痛风组(AG+IG患者)与HC组表达差异均有统计学意义.其中,IGF2BP2 在 GA 组[28.08(17.99,47.06)×10-4]的表达显著高于 HC 组[19.23(12.90,25.78)×10-4],WTAP、METTL14、YTHDF1 和 YTHDC2 在 GA 组[298.61(213.61,377.80)×10-4,9.94(6.43,13.46)×10-4,52.63(28.22,72.77)×10-4,40.24(20.74,73.32)×10-4]的表达均显著低于 HC 组[398.45(339.88,454.89)×10-4,13.27(11.07,15.85)×10-4,64.43(43.61,87.10)×10-4,53.11(36.37,79.28)×10-4];进一步亚组分析发现IGF2BP2、WTAP、METTL14、YTHDF1、YTHDC2 在 3 组间表达中差异均有统计学意义(H=19.62、31.73、13.14、16.64、28.90,P均≤0.001),WTAP 和 METTL14 在 AG 组[311.13(234.96,426.67)×10-4(Z=-3.27,P=0.001),9.64(5.21,15.21)×10-4(Z=-2.71,P=0.008)]与 IG 组[272.27(203.29,347.95)×10-4(Z=-5.78,P<0.001),10.40(6.88,12.88)×10-4(Z=-3.54,P=0.003)]的表达均低于 HC 组[398.45(339.88,454.89)×10-4,13.27(11.07,15.85)×10-4],但 AG 与 IG 之间差异无统计学意义(P>0.05);YTHDF1 和 YTHDC2 在 AG 组[38.10(16.19,56.78)×10-4,24.31(14.35,42.77)×10-4]均显著低于 IG 组[64.13(48.28,74.40)×10-4(Z=-3.54,P<0.001),65.49(39.89,91.23)×10-4(Z=-4.96,P<0.001)]和 HC 组[64.43(43.61,86.92)×10-4(Z=-3.51,P<0.001),53.11(36.37,79.28)×10-4(Z=-4.25,P<0.001)],但 IG 与 HC 组间差异无统计学意义(P>0.05);IGF2BP2 在 AG 组[25.32(16.40,40.43)×10-4]和 HC 组[19.23(12.90,25.78)×10-4]均显著低于 IG 组[31.10(22.60,49.58)×10-4](Z=-2.46,P=0.014;Z=-4.54,P<0.001),但 AG 和 HC 比较差异无统计学意义(P>0.05).②Spearman相关分析显示:在GA患者中,IGF2BP2、METTL14和YTHDF1的表达分别与血浆葡萄糖(r=0.22,P=0.037)、血尿酸(r=0.38,P=0.003)和总胆固醇(r=0.23,P=0.034)呈正相关,WTAP与血浆葡萄糖呈负相关(r=-0.25,P=0.020).③5个差异基因联合预测GA的ROC曲线下面积(95%CI)为0.90(0.84,0.95).结论 m6A修饰相关基因在GA中存在异常表达且与GLU和UA等临床指标相关,推测其可能参与GA的发病及对评估GA患者代谢有一定的参考价值.