查看更多>>摘要:目标 分析氯化锂(Lithium chloride,LiCl)在人非小细胞肺癌细胞(A549)抗甲型H3N2流感病毒(Influenza A virus(H3N2))活性研究.方法 不同浓度LiCl作用于A549细胞,24 h后观察细胞病变(cytopathic effect,CPE),CCK-8方法测定其对细胞活性的影响;H3N2(MOI=1)感染A549细胞后,加入不同浓度的LiCl作用24h,观察CPE、RT-qPCR方法测定病毒载量,测定病毒滴度;不同浓度LiCl提前和A549在37℃,5%CO2孵育2 h,加入病毒感染24 h,RT-qPCR方法测定病毒载量;LiCl、H3N2 和 A549 4 ℃孵育 1 h,35℃,5%CO2 培养 24 h,RT-qPCR 方法测定病毒载量;H3N2 和 A5494℃孵育1 h,然后加入不同浓度LiCl,35 ℃,5%CO2培养24h,RT-qPCR方法测定病毒载量;H3N2感染A549细胞后,加入不同浓度的LiCl作用24 h,分别检测上清和细胞的病毒RNA载量和病毒滴度,然后计算上清和细胞相应的比值H3N2(MOI=10)和BV(MOI=1)感染A549细胞后,加入不同浓度的LiCl作用24 h,RT-qPCR方法测定病毒载量.结果LiCl浓度<50 mmol/L时,A549的细胞活性>90%;不同浓度的LiCl均可显著降低H3N2病毒载量(P<0.000 1),LiCl处理组的CPE较病毒对照组有所缓解,并且呈剂量依赖性;LiCl不通过影响细胞本身抑制病毒复制;不同浓度LiCl显著抑制H3N2进入A549(P<0.000 1)也对吸附A549细胞有一定程度的抑制作用(P<0.01);LiCl不影响H3N2的组装和释放(P>0.05);最后也发现LiCl对多种流感病毒毒株有广谱的抗病毒效果(P<0.000 1).结论LiCl可能通过抑制H3N2吸附和进入A549细胞以及H3N2在A549细胞中复制来发挥抗病毒作用,为LiCl防治病毒感染提供了数据参考.