查看更多>>摘要:目的 建立一种儿童患者左氧氟沙星血浆浓度的液相色谱串联质谱测定方法,并进行应用评估.方法 前瞻性观察性研究.收集郑州大学附属儿童医院体检中心健康体检的儿童血浆标本作为空白血浆,以及5例呼吸科未使用左氧氟沙星、环丙沙星的儿童患者临床标本用于方法学验证.收集2023年10月1日至12月31日期间22例使用左氧氟沙星的儿童患者临床标本,男9例,女13例,年龄(8.1±3.7)岁,进行浓度测定.血浆样本经乙腈沉淀蛋白后,以环丙沙星为内标,采用液相色谱-质谱联用建立浓度测定方法.色谱柱为C18色谱柱(Shim-pac GIST-HPC18色谱柱,2.1 mm× 100 mm,3μm);流动相A为0.1%甲酸水溶液,B为0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.4ml/min,柱温40 ℃,进样量1μl,总分析时间为9 min.质谱离子源为电喷雾离子源,设定为正离子模式,扫描方式为多反应监测模式,左氧氟沙星和环丙沙星的离子对分别为362.10→318.1和332.15→231.05.对方法进行特异性、灵敏度、线性、精密度、准确度、加样回收率、稳定性、基质效应、残留效应性能验证.使用SPSS 17.0统计分析数据,采用K-S检验检测变量的正态性.双侧检验,P<0.05为差异有统计学意义.结果 血浆样品中左氧氟沙星在0.0625~20mg/L线性关系良好(R2>0.99),定量下限为0.062 5 mg/L.在不同质控水平下,准确度为92.57%~104.39%,批内及批间精密度为2.32%~9.35%.正常血浆基质、5%溶血血浆基质、15%高脂血浆基质不影响左氧氟沙星血药浓度检测,短期存放样品的稳定性较好,残留不影响待测物的定量分析.共收集检测22例患者的34份临床标本,其中2份标本左氧氟沙星血药浓度测定结果低于定量下限,其余左氧氟沙星浓度为0.091~6.755 mg/L.Cmax为(5.52±1.09)mg/L.结论 本研究建立的血浆左氧氟沙星液相色谱串联质谱的方法分析性能符合要求,仅需血浆50µl,可用于儿童患者左氧氟沙星血药浓度检测.