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浙江中医药大学学报
浙江中医药大学学报

范永升

月刊

1005-5509

zjzyxb@163.com

0571-86613692

310053

杭州市滨江区滨文路

浙江中医药大学学报/Journal Journal of Zhejiang Chinese Medical University北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊为全国一类中医学术性期刊，以报道本院教育、科研成果和临床经验为主，兼顾本省及国内外有学术见解的优秀中医学论文，以提高为主兼顾指导自学。
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    虫草素通过MEX3A抑制肝癌细胞增殖的机制研究

    陈威刘容刘丽林涵...
    1325-1333页
    查看更多>>摘要：[目的]探讨虫草素通过肌肉增生蛋白3A(muscle excess 3A,MEX3A)抑制肝癌细胞增殖的分子机制.[方法]以0、50、100、150、200及250µmol·L-1浓度的虫草素分别处理Huh-7肝癌细胞24、48及72 h,采用细胞增殖检测(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力,筛选出虫草素最佳干预浓度及时间.使用最佳干预浓度虫草素对Huh-7肝癌细胞进行干预,并进行高通量转录组测序,对测序结果进行生物信息学分析,筛选差异基因.设立空白对照组、MEX3A沉默组、MEX3A过表达组、虫草素组、虫草素+MEX3A沉默组和虫草素+MEX3A过表达组,以CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞的凋亡率及S期细胞比例,集落形成实验检测各组细胞的增殖情况.最后采用免疫印迹法检测各组细胞周期信号通路的关键蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、细胞周期蛋白依赖性激酶6(cyclin-dependent kinase 6,CDK6)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)及细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)表达的变化情况.[结果]虫草素最佳干预浓度为200µmol·L-1,干预时间为48 h.高通量测序后转录组基因差异分析显示,虫草素组与空白对照组共存在564个差异基因,下调明显的基因集包括MEX3A基因.京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析发现,明显下调的基因高度富集在细胞周期等促肝癌细胞增殖的信号通路.与空白对照组比较,虫草素可明显抑制Huh-7细胞中MEX3A的mRNA及蛋白表达(P<0.001).虫草素干预后Huh-7细胞活力降低、克隆数减少、凋亡增加、S期细胞比例减少(P<0.01).回复实验显示,虫草素+si-MEX3A使肝癌细胞的活力和克隆数进一步减少,凋亡率进一步增加(P<0.01),而S期细胞比例进一步减少(P<0.01).免疫印迹结果显示,虫草素干预组的CDK4、CDK6、Cyclin D1、CDK2和Cyclin E1蛋白表达明显降低(P<0.01),虫草素+MEX3A沉默组上述蛋白表达进一步降低(P<0.01).[结论]虫草素通过降低MEX3A表达调控细胞周期相关蛋白,从而抑制肝癌细胞的增殖.

    虫草素转录组测序生物学信息分析肝癌MEX3A细胞周期信号通路细胞增殖细胞凋亡

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    加味金匮肾气丸调控MUC5AC/EGFR通路干预铁死亡改善肾阳虚证哮喘大鼠的机制研究

    郭祥宋红陈家昊侯欣...
    1334-1344页
    查看更多>>摘要：[目的]探究加味金匮肾气丸改善肾阳虚证哮喘的可能作用机制.[方法]将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、加味金匮肾气丸组(简称中药组)、地塞米松组(简称地米组),每组10只.除对照组外,其他组均采用氢化可的松注射液和卵清蛋白(ovalbumin,OVA)联合诱导的方法构建肾阳虚证哮喘大鼠模型.定期监测大鼠体质量,并评估喘息症状;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)和过碘酸希夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色观察大鼠肺组织及支气管的病理形态;酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清中相关指标,免疫印迹法检测黏蛋白5AC(Mucin 5AC,MUC5AC)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测MUC5AC、EGFR、GPX4的mRNA表达.培养人支气管上皮细胞BEAS-2B,设置空白对照组、柠檬酸铁胺(ferric amine citrate,FAC)组、MUC5AC组、FAC+MUC5AC组,通过红菲咯咻微板法检测非血红素铁浓度;荧光染色检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,对比分析MUC5AC通路与铁死亡之间的关联性.[结果]与对照组比较,模型组大鼠肺组织支气管管壁增厚,大量炎细胞浸润,杯状细胞增生;血清白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)、白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)水平显著升高(P<0.05),皮质醇(cortisol,COR)水平明显下降(P<0.05),MUC5AC、EGFR的mRNA表达升高,GPX4的mRNA表达降低(P<0.05),MUC5AC、EGFR蛋白表达升高,GPX4蛋白表达降低(P<0.05).与模型组比较,中药组和地米组IL-4、IL-5、IL-13水平均降低,COR水平升高(P<0.05);MUC5AC、EGFR蛋白水平降低,GPX4蛋白水平升高(P<0.05);MUC5AC、EGFR的mRNA表达下调,GPX4的mRNA表达上调(P<0.05).与空白对照组比较,其他组非血红素铁浓度显著升高(P<0.05),ROS水平增加,且FAC+MUC5AC组比单纯MUC5AC、FAC用药组指标增高更明显.[结论]加味金匮肾气丸通过调节MUC5AC/EGFR通路干预铁死亡,从而改善肾阳虚证哮喘,其作用机制可能是减少黏液过度分泌并降低细胞对于铁离子的吸收率,减轻铁死亡.

    加味金匮肾气丸MUC5ACEGFRGPX4铁死亡肾阳虚支气管哮喘机制研究

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    槐耳清膏治疗大鼠肉芽肿性小叶性乳腺炎模型的作用研究

    张双艺祝琦许雷来谢小红...
    1345-1354页
    查看更多>>摘要：[目的]探讨槐耳清膏通过降低炎症水平治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎(granulomatous lobular mastitis,GLM)大鼠的作用.[方法]将雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、槐耳组[槐耳清膏4.5 g/(kg·d)]、激素组[醋酸泼尼松龙0.0018 g/(kg·d)],利用GLM病变组织与弗氏完全佐剂混合后的组织匀浆诱导GLM大鼠模型.给药14 d后,对各组大鼠进行乳腺大体观察,以大鼠乳腺炎症指数评分表进行炎症指数评分,苏木精-伊红染色后进行乳腺组织病理学观察,并通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠血清炎症细胞因子的表达水平,采用16S rRNA扩增子测序技术测定各组大鼠肠道菌群的多样性、丰度以及肠道菌群相对丰度.[结果]与正常组比较,模型组大鼠乳房皮色红,出现明显肿块,且乳腺炎症指数显著上升(P<0.05);病理学改变包括形成以乳腺小叶为中心的肉芽肿,伴大量淋巴细胞、浆细胞等炎症细胞浸润,证实成功诱导GLM大鼠模型.与模型组比较,槐耳组及激素组大鼠乳房外观红肿改善,肿块变软,炎症指数均下降(P<0.05,P<0.05),乳腺炎症程度明显改善,炎症细胞减少,血清炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平显著降低(P<0.05,P<0.05,P<0.05),乳腺组织淋巴细胞、浆细胞等炎症细胞浸润减少.模型大鼠肠道菌群发生明显变化,差异具有统计学意义(P<0.05).模型组大鼠肠道菌群中乳杆菌目、放线菌门、双歧杆菌目、红蝽菌纲丰度下调,柄杆菌目和脱硫菌门丰度上调.槐耳清膏干预后,模型大鼠肠道菌群中梭菌纲丰度下调,拟杆菌门、红螺菌目丰度上调.[结论]槐耳清膏能够缓解GLM模型大鼠炎症症状,有效减轻GLM模型大鼠乳腺组织炎症细胞浸润,抑制上皮细胞增生及炎性肉芽肿的形成,降低GLM模型大鼠血清炎症细胞因子水平,同时调节大鼠肠道菌群,其作用机制可能跟增强大鼠自身免疫力、调节肠道菌群,进而有效缓解炎症反应有关.

    免疫失衡肉芽肿性小叶性乳腺炎槐耳槐耳清膏肉芽肿性小叶性乳腺炎动物模型肠道菌群炎症

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    中药灌肠方基于NLRP3/SIRT6信号通路改善葡聚糖硫酸钠诱导结肠炎的作用机制研究

    顾红田玉雯夏晶晶马炯...
    1355-1362页
    查看更多>>摘要：[目的]探究中药灌肠方对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的保护作用及其作用机制.[方法]给予C57BL/6J小鼠自由饮用2.5％DSS水溶液7 d以诱导UC.2 d后给药组分别给予低、中、高剂量(1.3、2.6、5.2 g/kg)的中药灌肠方和阳性药柳氮磺吡啶0.2 g/kg灌肠,模型组和正常组给予等体积0.9％氯化钠溶液灌肠.以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠结肠组织切片病变程度;采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)水平;采用生理生化检测试剂盒检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;免疫印迹法检测小鼠结肠组织闭锁小带蛋白-1(zonula occludens protein-1,ZO-1)、闭合蛋白(occludin)、核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、沉默调节蛋白6(sirtuin 6,SIRT6)蛋白表达水平.[结果]与正常组比较,DSS可诱导结肠炎症、隐窝丢失、杯状细胞耗竭、炎性浸润;血清TNF-α、IL-6、IL-1β及IL-18炎症因子水平,MPO活性和NO、MDA水平明显升高(P<0.01,P<0.001),SOD活性明显降低(P<0.01).与模型组比较,中药灌肠方治疗后明显改善DSS诱导的结肠炎症隐窝丢失、杯状细胞耗竭、炎性浸润的现象;血清TNF-α、IL-6、IL-1β及IL-18炎症因子水平,MPO活性和NO、MDA水平明显降低(P<0.01,P<0.001),中剂量和高剂量组SOD活性明显升高(P<0.05).中药灌肠方组小鼠结肠组织ZO-1、occludin、SIRT6的蛋白表达水平明显升高(P<0.001,P<0.01,P<0.05),中剂量和高剂量组NLRP3蛋白表达水平明显降低(P<0.01).[结论]中药灌肠方对DSS诱导的UC具有治疗作用,其机制包括缓解炎症、减轻氧化应激、改善肠道屏障通透性以及调节NLRP3/SIRT6信号通路.

    溃疡性结肠炎中药灌肠方炎症氧化应激肠道屏障紧密连接NLRP3SIRT6

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    QAMS多成分定量及PCA、OPLS-DA、EW-TOPSIS分析综合评价元宝草药材质量

    张建方陈宗良董莹盈孙皎...
    1363-1376页
    查看更多>>摘要：[目的]建立不同产地元宝草中12个成分含量同步检测方法,并采用化学计量学和熵权逼近理想解排序(entropy weight-technique for order preference by similarity to an ideal solution,EW-TOPSIS)法对其质量进行评价.[方法]采用Agilent 5 TC-C18色谱柱,以0.5％磷酸-乙腈为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm和210 nm,以芒果苷为内参物,建立其与芦丁、金丝桃苷、槲皮素、山柰酚、Ⅰ3,Ⅱ8-双芹菜苷元、1,7-二羟基呫吨酮、1,3-二羟基-5-甲氧基呫吨酮、1,3,6,7-四羟基呫吨酮、大黄素、大黄素甲醚、贯叶金丝桃素的相对校正因子,并计算含量,同时以外标法测定18批元宝草中12个成分的含量;采用化学识别模式和EW-TOPSIS法建立元宝草质量优劣评价模型,对其整体质量进行综合评价.[结果]外标法方法学考察结果均符合《中国药典》要求;一测多评(quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS)法与外标法所得含量结果无明显差异.主成分分析(principal component analysis,PCA)结果显示18批样品聚为3类;正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)将18批样品显著分类,筛选出导致不同产地元宝草质量差异的5个差异标志物;EW-TOPSIS法分析结果显示四川、贵州和广西产地元宝草整体质量较好.[结论]元宝草中12种成分含量测定的QAMS法,操作便捷,结果准确;化学模式识别及EW-TOPSIS法客观全面,可用于元宝草的整体质量评价.

    元宝草高效液相色谱-一测多评法化学模式识别主成分分析正交偏最小二乘判别分析法熵权逼近理想解排序法质量评价

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    基于因果链理论的百合病发生发展演变规律及证治探析

    周昀璐李荣群金越沈祥峰...
    1377-1383页
    查看更多>>摘要：[目的]基于因果链理论探讨百合病发生发展的演变规律及治疗思路.[方法]运用因果链分析方式梳理百合病的条件原因、根本原因,追溯百合病的直接原因,并总结相应的治则治法,列举临床验案一则加以佐证.[结果]通过构建百合病的因果链条,捋清了百合病发展中的演变规律,分析出因果关系.百合病条件原因为余邪未尽与情志不遂;心肺阴虚内热是根本原因,是百合病发生的关键因素;在此基础上,心肺进一步受损引起"心失神,肺失魄"的病变直接导致情志、行为、感觉三大方面的异常,最终发展为百合病.因此,"心失神,肺失魄"是百合病的直接原因.并且本病的直接原因与根本原因可形成反馈链,相互作用影响.针对直接原因提出百合病治则为心肺同调、安神定魄.所附医案辨证属于心肺阴虚内热、神魄失司证,治法为滋阴清热、养心润肺、安神定魄,取得较好疗效.[结论]心肺神魄失司是百合病的直接原因.运用因果链分析百合病,能够聚焦本质,指导临床更加全面、直观、立体地认识百合病,为临床诊疗提供新的思路和方法,以提高精准辨治能力.因果链现代思维的运用也有助于中医学科思维模式的创新与发展.

    百合病《金匮要略》因果链心失神肺失魄安神定魄

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    基于需求驱动的中医药古籍校内传播的若干思考与实践——以浙江中医药大学图书馆为例

    郑红月诸佳珍胡美君徐光星...
    1384-1390页
    查看更多>>摘要：[目的]总结基于需求驱动的中医药古籍校内传播的成果、价值与优势.[方法]通过文献研究、实证研究等方法,在检视当下古籍传播不足的基础上,阐述"需求"要素的决定性价值,并进一步从观念的植入、古籍阅读技术性困难的化解、古籍传播与教学科研接轨、平台建设4个方面介绍基于需求驱动的中医药古籍校内传播的相关实践.[结果]基于供给驱动的传播存在着供给端热而需求端冷的问题,而且对精英群体的需求反馈相对淡漠,使传播方式低效.基于需求驱动的传播策略实施3年来,大学生医学文献年借阅量、师生发表古籍研究论文数量与质量增长势头强劲,图书馆古籍与相关科普平台建设迈上了新台阶.[结论]通过对浙江中医药大学中医药古籍校内传播的个案研究,探索基于需求驱动的传播策略,赋予传播以内生的动力,体现其得天独厚的优势,从而切实提高传播效率.

    中医药古籍需求驱动传播策略论文质量期刊数量科普平台创新项目传承发展

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    巴元明基于"肾虚不满,瘀积内实"理论运用金枯二仙地黄汤治疗单纯性肾囊肿经验

    胡鑫宇巴元明
    1391-1395页
    查看更多>>摘要：[目的]探讨巴元明教授基于"肾虚不满,瘀积内实"理论,运用金枯二仙地黄汤治疗单纯性肾囊肿(simple renal cyst,SRC)经验.[方法]通过临床跟师学习,收集总结门诊SRC患者的病历资料,总结探讨巴教授基于"肾虚不满,瘀积内实"理论结合脏腑辨证治疗SRC的学术思想及临床经验,并列举验案加以佐证.[结果]巴元明教授认为,SRC的病因病机主要为肾虚不满、瘀积内实,治疗宜消积化瘀、补肾护元.临床善用自拟金枯二仙地黄汤加减治疗,即知柏地黄丸合水陆二仙丹加夏枯草、鸡内金.所附的SRC验案辨证为气阴两虚、瘀积蕴结,治以滋阴益肾、化湿消积之法,方选金枯二仙地黄汤随证加减,取得较好疗效.[结论]巴教授基于"肾虚不满,瘀积内实"理论治疗SRC疗效显著,为临床SRC的诊疗提供了新思路.

    单纯性肾囊肿金枯二仙地黄汤巴元明肾虚不满瘀积内实医案名医经验

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    陈永灿经方组合辨治脾胃病举隅

    白钰任莉陈永灿
    1396-1399页
    查看更多>>摘要：[目的]从经方组合运用的角度阐述陈永灿治疗脾胃病的临证经验.[方法]选取陈永灿门诊中能够体现其以经方组合为主诊治相关疾病的典型医案3则,即生姜半夏汤合二陈汤治小儿功能性呕吐、大黄附子汤合四磨饮子治顽固性便秘、桃花汤合葛根芩连汤治溃疡性结肠炎,详细介绍辨治思路,重点阐述对上述仲景方药的灵活运用和对《伤寒论》条文的独到见解.[结果]生姜半夏汤为主,配合二陈汤,更好地发挥其降逆止呕、化饮和胃的作用,从而快速解决小儿呕吐;大黄附子汤加入四磨饮子,转换为温通的思路,突破了顽固型便秘的窘境;桃花汤合葛根芩连汤治疗溃疡性结肠炎,以清湿热、解毒滞、凉血热为辨治方向,疗效满意,并提出了桃花汤非温涩之剂的独特见解.[结论]陈永灿临证活用经方组合治疗脾胃病的经验,对当今医者中医药临床水平的提升有积极的借鉴意义.

    经方《伤寒论》脾胃病临证经验生姜半夏汤二陈汤医案陈永灿

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    汪受传消风法治疗小儿湿疹经验

    步鑫萍汪受传
    1400-1403页
    查看更多>>摘要：[目的]总结汪受传教授治疗小儿湿疹的临证经验.[方法]通过查阅相关资料、跟师临证、收集整理医案等方式,阐述汪教授对小儿湿疹病因、病机、病位的认识,分析并总结汪教授治疗该病的诊治思路及用药经验,附验案以资验证.[结果]汪教授认为小儿湿疹,风、湿、热邪是关键致病因素,伏风内潜是病机关键,病位在肌表,与肺、脾、心、肝诸脏均有关.辨证施治上以消风为治则,湿热浸淫者治以消风止痒祛湿热,火毒炽盛者治以凉血消风解火毒,脾虚湿蕴者治以除湿消风健脾气,血虚风燥者治以润燥消风滋阴血.所附验案中患者初为湿热壅盛之证,方拟四妙散化裁;后转为脾虚湿盛证,方选参苓白术散为底,随症加减,终获良效.[结论]汪教授辨治小儿湿疹,结合伏风理论及小儿的体质特点,紧扣病机,以消风为第一要义,佐以除湿、清热、健脾、养血等法,疗效显著,其经验值得学习及推广.

    湿疹儿科消风法内外合治医案名医经验汪受传

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