查看更多>>摘要:目的 明确病炎清的抗流感病毒活性,基于网络药理学和实验验证探究病炎清治疗流感的潜在机制.方法 检测病炎清对流感模型小鼠死亡率、肺指数、肺病毒量的影响.检索TCMSP、Swiss Target Prediction等数据库及文献,收集病炎清处方成分及靶点;通过Cytoscape软件构建病炎清抗流感"成分-共有靶点"网络;通过STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作(Protein-Protein Interaction,PPI)网络,筛选核心靶点;对共有靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析.在体内水平探究病炎清减轻流感所致氧化损伤的作用,以及对抗氧化和促氧化酶表达、P65蛋白磷酸化、核因子E2 相关因子 2(Nuclear Factor Erythroid-Derived 2-Related Factor 2,Nrf2)核易位的影响.结果 病炎清可明显降低流感模型小鼠死亡率,降低肺指数和肺病毒量,减轻肺损伤.检索得到病炎清 193 个活性成分,对应 338 个靶点,其中与流感相关的靶点 180 个,IκBα激酶α(CHUK)、IκBα激酶γ(IKBKG)、NF-κB p65(RELA)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素 6(IL6)等 9 个靶点为潜在核心靶点.GO分析提示病炎清具有抗菌、抗氧化应激等多种生物功能.KEGG分析表明病炎清涉及多条病毒及免疫通路,如疱疹病毒、甲型流感病毒、肿瘤坏死因子和Toll样受体途径.动物实验表明,相较于磷酸奥司他韦,病炎清高剂量组可更明显地降低流感模型小鼠肺丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量(P<0.01)、提升肺总超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性(P<0.001).相较于磷酸奥司他韦,病炎清&磷酸奥司他韦联合给药组肺部具有更低的NADPH氧化酶 2(NADPH Oxidase Type 2,NOX2)、4(NOX4)水平(P<0.001)和更高的过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 4(Glutathione Peroxidase 4,GPX4)水平(P<0.001).另外,联合给药组显示出更强的Nrf2 核易位(P<0.05).但联合给药组P65 蛋白磷酸化水平与磷酸奥司他韦组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但均低于模型组(P<0.05).结论 病炎清具有明显的抗流感病毒活性,可发挥抑制促氧化酶合成和促进抗氧化系统的双重作用,减轻流感引发的氧化应激损伤.