Isolation and purification of antimicrobial protein from Bacillus amyloliquefaciens ASR-12 and cloning of its coding gene
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为了从菌株ASR-12发酵液中分离纯化获得抗菌蛋白.将菌株ASR-12发酵液经硫酸铵沉淀、透析除盐后获得粗蛋白,粗蛋白进行热处理和Q Sepharose Fast Flow柱层析,纯化后的蛋白进一步进行LC-MS鉴定,并克隆其编码基因进行测序.粗蛋白经热处理和柱层析后得到5个吸收峰,活性检测结果显示峰Ⅳ具有较高抑菌活性,经SDS-PAGE检测显示为单一条带,分子量约为50 kDa.LC-MS鉴定结果显示抗菌蛋白与M42家族肽酶同源性最高,覆盖度达到80％;并能从菌株ASR-12基因组中克隆到M42家族肽酶编码基因,测序结果经BLAST比对与解淀粉茅孢杆菌B9601-Y2的M42家族肽酶编码基因同源性达100％.菌株ASR-12产生的抗菌蛋白中,M42家族肽酶为主要活性成分.
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