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薏苡黑穗病快速检测方法研究

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以薏苡黑穗病菌粉胞内蛋白为免疫原,制备抗体,建立薏苡黑穗病ELISA检测方法.结果表明,测定纯化后抗体的最高效价为1:800000,具特异性强;方阵试验测定抗原的最佳包被浓度为103 CFU/mL,抗体的工作浓度为1:4000;优化ELISA检测条件,确定抗体4℃过夜(8～12 h)包被效果最好,选择1％酪蛋白作为抗体的封闭液,抗体的最佳封闭时间为1.5 h,抗体的最佳孵育时间为2.5 h,最佳底物作用时间为15 min;建立ELISA标准工作曲线,表明抗体的灵敏度为104 CFU/mL.ELISA检测田间采集的黑穗病病叶显示,抗体可与病叶提取液发生特异性反应,而与健康叶提取液呈阴性反应,由此可确定黑穗病的存在与否.该方法可用于田间薏苡黑穗病快速检测,以及时指导病害防治.
Study on Rapid Detection Method of Coix lacryma-jobi Smut

王健、杨成龙、杨小雨、周明强

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贵州省农业科学院亚热带作物研究所,贵州兴义562400

薏苡黑穗病 抗体 酶联免疫反应

国家自然科学基金贵州省科技厅、贵州省农业科学院联合项目贵州省科技厅、贵州省农业科学院联合项目贵州省第五批人才基地项目贵州省农业科学院院专项贵州农业科技支撑项目

31760423黔科合LJH字〔2014〕7709黔科合LJH字〔2014〕7683黔人领发〔2016〕22号黔农科院院专项〔2016〕019号黔科合支撑〔2017〕2508

2020

安徽农业科学
安徽省农业科学院

安徽农业科学

影响因子：0.413
ISSN：0517-6611
年,卷(期)：2020.48(5)
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