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鸡细小病毒与H9亚型禽流感病毒二重PCR检测方法的建立

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[目的]建立一种能够同时诊断鸡细小病毒(chincken parvovirus,ChPV)和H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的检测方法.[方法]根据GenBank中已发表的ChPV NS基因、H9亚型AIV HA基因的保守序列,分别设计多对引物,并通过一系列不同组合对温度和反应体系的调整试验,最终筛选出2对最佳特异性引物组合,建立了ChPV和AIV二重PCR检测方法用于ChPV和H9亚型AIV的检测.[结果]特异性和敏感性的试验结果表明,建立的二重PCR方法特异性良好,可以在一管PCR反应同时检测ChPV和H9亚型AIV.针对ChPV NS基因和H9亚型AIV HA基因的扩增片段大小分别为558和367 bp,其他常见的禽病病原体均未见阳性反应;该法对ChPV和H9亚型AIV的检测下限均为5×104拷贝/μL质粒;临床样品检测结果表明,对140份临床样品检测结果与AIV分离测序及ChPV PCR阳性产物测序结果完全一致.[结论]建立的ChPV和H9亚型AIV二重PCR检测方法不仅特异性良好,而且检测的灵敏度高,对ChPV和H9亚型AIV的监测及有效防控具有重要意义.
Development of a Duplex RT-PCR Assay for Detection of ChPV and AIV H9 Subtype

李丹、谢芝勋、李孟、罗思思、谢丽基、张民秀、黄娇玲、范晴、王盛、谢志勤、邓显文、曾婷婷、张艳芳

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广西壮族自治区兽医研究所,广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁530001

鸡细小病毒 H9亚型禽流感病毒 二重PCR

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桂科 AD17195083桂科 AA172040572019-792016-37-88

2020

安徽农业科学
安徽省农业科学院

安徽农业科学

影响因子：0.413
ISSN：0517-6611
年,卷(期)：2020.48(9)
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