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基于分子对接技术的抗新霉素单链抗体制备和进化

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为了制备高灵敏度、高特异性的抗新霉素单链抗体,试验采用从杂交瘤细胞中提取单链抗体基因,转入大肠杆菌表达系统进行表达.然后采用分子对接的方法研究抗新霉素单链抗体和新霉素分子的识别机制并进行虚拟突变,将关键结合位点的氨基酸残基进行突变,在对突变体进行表达和纯化后建立间接竞争酶联免疫吸附分析方法.结果表明:氨基酸残基Leu227为单链抗体与新霉素结合的关键氨基酸残基,将其突变为Asp,获得突变体.IC50为1.58 ng/mL,相比于亲本单链抗体的26.23 ng/mL,突变体的敏感性提高了16.6倍.试验成功制备了高灵敏度、高特异性的抗新霉素单链抗体,为动物源性食品中的抗生素残留检测提供了研究基础.
Preparation and Evolution of Anti-Neomycin Single-chain Antibody Based on Molecular Docking Technology

王方雨、张运尚、胡曼、樊剑鸣

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河南农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州450002

郑州大学公共卫生学院,河南郑州450001

单链抗体 氨基糖苷类抗生素 药物残留检测 分子识别机制 间接竞争酶联免疫吸附法

感谢国家重点研究计划

2018YFC1602902

2020

安徽农业科学
安徽省农业科学院

安徽农业科学

影响因子:0.413
ISSN:0517-6611
年,卷(期):2020.48(20)
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