安徽农业科学2021，Vol.49Issue(3) ：105-109.DOI:10.3969/j.issn.0517-6611.2021.03.028

丝瓜LcPPO1基因CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建

Construction of CRISPR/Cas9 Gene Editing Vector of LcPPO1 Gene in Luffa

陈敏氡 王彬 刘建汀 叶新如 曾美娟 朱海生 温庆放 康玉妹
安徽农业科学2021，Vol.49Issue(3) ：105-109.DOI:10.3969/j.issn.0517-6611.2021.03.028
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丝瓜LcPPO1基因CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建

Construction of CRISPR/Cas9 Gene Editing Vector of LcPPO1 Gene in Luffa

陈敏氡 1王彬 1刘建汀 1叶新如 1曾美娟 1朱海生 1温庆放 1康玉妹1
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作者信息

  • 1. 福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013
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摘要

[目的]通过CRISPR/Cas9系统构建丝瓜LcPPO1基因编辑载体.[方法]根据前期已经克隆得到的LcPPO1基因序列,设计2个sgRNA靶位点序列,退火制备sgRNA双链,分别与线性PCA1301-Cas9载体连接获得2个重组载体,将重组载体转化DH5α感受态细胞,再对其进行PCR鉴定及测序比对分析.[结果]2个sgRNA靶位点序列已经分别准确地连入PCA1301-Cas9载体,插入序列无突变.[结论]成功构建了丝瓜LcPPO1基因编辑载体PCA1301-Cas9-sgRNA1和PCA1301-Cas9-sgRNA2,为后续研究丝瓜LcPPO1基因功能奠定了基础.

关键词

丝瓜/LcPPO1基因/CRISPR/Cas9技术/基因编辑

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基金项目

福建省自然科学基金(2019J01112)

福建省现代蔬菜产业技术体系岗位专家项目(2018R1026-5)

福建省农业科学院科技创新团队建设项目(STIT2017-1-2)

国家大宗蔬菜产业技术体系福州综合试验站项目(CARS-23-G-53)

设施蔬菜种质收集及基因发掘、品种创新与产业化(2018NZ0002-3)

福建省属公益类专项(2019R1031-2)

出版年

2021
安徽农业科学
安徽省农业科学院

安徽农业科学

影响因子：0.413
ISSN：0517-6611
被引量2
参考文献量24
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