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丝瓜LcPPO1基因CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建

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[目的]通过CRISPR/Cas9系统构建丝瓜LcPPO1基因编辑载体.[方法]根据前期已经克隆得到的LcPPO1基因序列,设计2个sgRNA靶位点序列,退火制备sgRNA双链,分别与线性PCA1301-Cas9载体连接获得2个重组载体,将重组载体转化DH5α感受态细胞,再对其进行PCR鉴定及测序比对分析.[结果]2个sgRNA靶位点序列已经分别准确地连入PCA1301-Cas9载体,插入序列无突变.[结论]成功构建了丝瓜LcPPO1基因编辑载体PCA1301-Cas9-sgRNA1和PCA1301-Cas9-sgRNA2,为后续研究丝瓜LcPPO1基因功能奠定了基础.
Construction of CRISPR/Cas9 Gene Editing Vector of LcPPO1 Gene in Luffa

陈敏氡、王彬、刘建汀、叶新如、曾美娟、朱海生、温庆放、康玉妹

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福建省蔬菜遗传育种重点实验室,福建省农业科学院作物研究所,蔬菜研究中心/福建省蔬菜工程技术研究中心,福建福州350013

丝瓜 LcPPO1基因 CRISPR/Cas9技术 基因编辑

福建省自然科学基金福建省现代蔬菜产业技术体系岗位专家项目福建省农业科学院科技创新团队建设项目国家大宗蔬菜产业技术体系福州综合试验站项目设施蔬菜种质收集及基因发掘、品种创新与产业化福建省属公益类专项

2019J011122018R1026-5STIT2017-1-2CARS-23-G-532018NZ0002-32019R1031-2

2021

10.3969/j.issn.0517-6611.2021.03.028

安徽农业科学
安徽省农业科学院

安徽农业科学

影响因子：0.413
ISSN：0517-6611
年,卷(期)：2021.49(3)
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