安徽农业科学2022，Vol.50Issue(2) ：109-111,117.DOI:10.3969/j.issn.0517-6611.2022.02.029

1株假单胞菌oprD基因缺失和回补载体的构建

Construction of oprD Gene Deletion and Complement Vector of Pseudomonas sp.

朱艳容 刘志新 杨靖 韩韵 陈果 徐祥
安徽农业科学2022，Vol.50Issue(2) ：109-111,117.DOI:10.3969/j.issn.0517-6611.2022.02.029
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1株假单胞菌oprD基因缺失和回补载体的构建

Construction of oprD Gene Deletion and Complement Vector of Pseudomonas sp.

朱艳容 1刘志新 2杨靖 2韩韵 3陈果 3徐祥1
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作者信息

  • 1. 湖北医药学院基础医学院,湖北十堰442000;长江水利委员会水文局汉江水文水资源勘测局,湖北襄阳441000
  • 2. 湖北医药学院基础医学院,湖北十堰442000
  • 3. 长江水利委员会水文局汉江水文水资源勘测局,湖北襄阳441000
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摘要

[目的]构建假单胞菌毒性基因(oprD)缺失突变株,为进一步探讨其编码的毒力因子功能奠定基础.[方法]利用pEX18Gm质粒作为基因敲除的载体,构建假单胞菌oprD基因重组自杀质粒,通过同源重组并激活自杀基因方式,筛选到目的基因缺失的突变株,再利用pBBR1MCS-2质粒作为目的基因回补的载体,构建回补载体.[结果]同源重组后,经过庆大霉素和氯霉素双抗平板、蔗糖平板筛选和PCR鉴定,成功获得了oprD基因缺失突变株,类似操作获得了回补菌株.[结论]基因缺失突变株的成功构建可为下一步的毒性机理研究奠定基础.

关键词

假单胞菌/毒力因子/基因敲除/基因回补

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基金项目

湖北省教育厅指导性项目(B2016113)

出版年

2022
安徽农业科学
安徽省农业科学院

安徽农业科学

影响因子：0.413
ISSN：0517-6611
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参考文献量9
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