摘要
[目的]通过分析比较不同品种苹果的NFC与FC果汁在DNA方面的差异,为NFC果汁的真伪鉴别和NFC果汁标准的建立提供科学方法和试验依据.[方法]在传统CTAB提取DNA方法的基础上加入纳米硅基磁珠(Si-OH@Fe3 O4 NPs)以提高苹果汁DNA的提取浓度,开发实时定量PCR,以鉴别NFC苹果汁和掺假(AAJ)果汁.[结果]试验确定的磁珠提取DNA最佳条件是样品用量1 mL和颠倒混匀3 min,提取出的DNA浓度均在50~60 ng/mL;在NFC苹果汁中连续稀释DNA的RT-PCR扩增标准曲线是y=-2.0959x+30.7140,R2=0.9985;不同程度掺假NFC苹果汁中DNA的RT-PCR扩增曲线为y=0.9683x+28.5910,相关性为R2=0.9819.[结论]这种基于新的DNA提取方法的RT-PCR技术在NFC苹果鉴伪中有着良好的稳定性、可重复性、可靠性;试验建立的方法可为NFC果汁的鉴伪检验提供有用工具.
基金项目
国家科技部重点研发计划(2017YFD0400700)
农业部苹果产业体系项目(CARS-27)