摘要
[目的]探究CaM在香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)壳钙代谢中的作用及分子机制.[方法]以香港牡蛎为试验材料,利用RACE-PCR技术克隆获得了香港牡蛎钙调蛋白(CaM)基因cDNA序列,并进行生物信息学分析和qRT-PCR试验.[结果]香港牡蛎CaM基因的cDNA序列全长为770 bp,开放阅读框为450 bp,5′端非编码区54 bp,3′非编码区266 bp,共编码149个氨基酸;预测CaM蛋白分子量为16.82 kD,理论等电点为4.14,亲水性(GRAVY)总平均值为-0.656,不稳定指数为31.08,属于稳定性亲水蛋白.氨基酸序列同源性分析和基因系统进化树结果显示,香港牡蛎与长牡蛎的CaM相似性最高,亲缘关系最近,其系统进化分析与传统的形态学分类相吻合.实时荧光定量PCR结果显示,CaM基因在香港牡蛎的各个组织中均有表达,其中在鳃中的表达量最高(P<0.05),外套膜次之,鳃是参与牡蛎钙代谢中钙吸收的关键器官,外套膜是分泌有机质的关键器官.[结论]推测该基因在香港牡蛎壳形成过程中调节钙的摄取、运输和分泌方面发挥重要作用.
基金项目
广西壮族自治区重点研发计划(2018AB52002)
广西壮族自治区研究生教育创新计划(YCSW2021353)
广西壮族自治区研究生教育创新计划(YCSW2020245)
国家重点研发计划(2018YFD0901406)
国家自然科学基金面上项目(31873042)
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