摘要
[目的]优化白术叶片DNA提取方法,提取高质量DNA,用于分子生物学研究.[方法]以白术叶片为材料,比较常规CTAB法、改良CTAB法、SDS法、试剂盒法提取DNA的效果,并对改良CTAB法中的裂解温度、裂解时间、核分离液解离次数进行优化,用琼脂糖凝胶电泳和微量核酸测定仪检测DNA的浓度和纯度.最后通过ISSR-PCR验证优化的改良CTAB法提取DNA的效果.[结果]4 种方法中,改良CTAB法提取白术叶片DNA效果最好.针对叶片的改良CTAB法的优化条件为裂解温度 65℃、裂解时间 20 min、解离次数 2次;ISSR-PCR验证结果表明扩增条带清晰稳定,无拖尾.[结论]优化后的改良CTAB法提取白术叶片DNA质量高,可用于白术种质资源遗传多样性分析.
基金项目
现代农业产业技术体系建设专项(CARS-21)
湖北省农业科技创新中心2020年重大科技研发项目(2020-620-000-002-04)
湖北省重点研发计划(2020BCA059)
湖北省农业科学院青年科学基金(2021NKYJJ19)
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