安徽农业科学2023，Vol.51Issue(12) ：171-175.DOI:10.3969/j.issn.0517-6611.2023.12.039

烟草花叶病毒实时荧光定量PCR检测体系的构建

Establishment of Real-time PCR Detection Method of Tobacco Mosaic Virus

吴彦辉 蒲团卫 张生杰 牛龙龙 白静科 李成军 李建华
安徽农业科学2023，Vol.51Issue(12) ：171-175.DOI:10.3969/j.issn.0517-6611.2023.12.039
✕
  • 国家科技期刊平台
  • NETL
  • NSTL
  • 维普
  • 万方数据

烟草花叶病毒实时荧光定量PCR检测体系的构建

Establishment of Real-time PCR Detection Method of Tobacco Mosaic Virus

吴彦辉 1蒲团卫 1张生杰 1牛龙龙 2白静科 2李成军 2李建华1
扫码查看

作者信息

  • 1. 河南省烟草公司许昌市公司,河南许昌 461000
  • 2. 河南省农业科学院烟草研究所/烟草行业黄淮烟区烟草病虫害绿色防控重点实验室,河南许昌 461000
  • 折叠

摘要

[目的]防止隐症携带烟草花叶病毒(TMV)的烟苗移栽到大田造成产量损失.[方法]根据TMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因保守序列设计引物及探针,通过绘制标准曲线、重复性、特异性及灵敏性分析,建立了一种TMV的TaqMan-qPCR检测方法.[结果]该方法特异性好,与其他常见的烟草病毒无交叉反应;灵敏度高,检测下限可达到4.53×101 copies/μL,比常规RT-PCR检测灵敏度提高了10倍;建立的标准曲线斜率为-3.299,决定系数(R2)为0.993 3,扩增效率为100.97%,且循环阈值(Ct)与质粒标准品浓度之间线性关系良好,重复性试验结果可靠.[结论]利用建立的TaqMan-qPCR检测方法与常规RT-PCR检测方法同时检测烟苗样品,检测结果一致,进一步验证了荧光定量PCR方法的可靠性.

关键词

烟草花叶病毒/实时荧光定量PCR/TaqMan探针法

引用本文复制引用

基金项目

许昌市烟草公司科技项目(2021411000240104)

出版年

2023
安徽农业科学
安徽省农业科学院

安徽农业科学

影响因子：0.413
ISSN：0517-6611
被引量1
参考文献量35
段落导航相关论文